《血管紧张素-（1-7）通过抑制活性氧激活的环氧合酶-2通路保护心肌细胞对抗高糖引起的损伤2016年论文》.pdfVIP

解剖学研究 2015年第 37卷第 3期 AnatRes，2015，Vo1．37No．3 161 · 论 著 血管紧张素一(1—7)通过抑制活性氧激活的 环氧合酶．2通路保护心肌细胞对抗高糖引起的损伤 谭其平， 陈景福 ， 梁鉴文， 梁伟杰 ， 宋明才 ， 郑东诞 ， 廖新学 (罗定市人 民医院东院区，广东罗定 527200) 摘【要】 目的 探讨活性氧(ROS)激活的环氧合酶一2(COX．2)通路在高糖(HG)损伤H9c2心肌细胞中的作用及血管 紧张素．(1．7)[Ang一(1-7)]能否通过调控ROS激活的COX．2通路抑制HG引起的心肌细胞损伤。方法 应用 Westernblot 法检测COX2蛋 白的表达 ；细胞计数盒(CCK一8)测定细胞存活率 ；Hoechst33258核染色检测凋亡细胞的形态及数量的变 化；DCFH．DA染色荧光显微镜测定细胞 内ROS水平 ；JC．1染色荧光显微镜照相测定线粒体膜电位 (MMP)。结果 应用 1000Ixmol／LROS清除剂 (N一乙酰半胱氨酸，NAC)或 1Ixmol／LAng一(1—7)共处理H9c2心肌细胞 12h能显著地抑制 HG对 COX．2表达的上调作用 ；35mmol／L葡萄糖 (HG)处理心肌细胞 24h引起 明显的损伤作用 ，使细胞存活率和 MMP降低 ，凋 亡细胞数量及细胞内ROS生成增多；Ang．(1．7)或 COX一2抑制剂 (NS．398)共处理心肌细胞明显地抑制上述 HG引起的损伤 作用。结论 Ang．(1．7)通过抑制 ROS激活 COX一2通路保护心肌细胞对抗 HG引起的损伤。 【关键词】 血管紧张素一(1—7)； 活性氧；环氧合酶．2；H9c2心肌细胞； 高糖 Angiotensin·(1-7)protectscardiomyocytesagainstthehighglucose-inducedinjurybyinhibitingROS-activatedCox-2path- way TANQi—ping，CHEN西 ，LIANGJian—wen，LIANGWei-jie，SHONGMing—cai，ZHENDong—dan，LIA0Xin一ue． Luo—dingCityPeople’sHospitd，Luoding，527200，China Correspondingauthor：LIA0Xin— ，E—mail：liaoxinx@mail．sysu．edu．cn A【bstract】 Objective Toinvestinatetherolesofreactiveoxygenspecies(ROS)一activatedcyclooxygenase一2(COX-2)inhigh glucose(HG)一inducedcardiomyocyteinjuryandwhetherAngiotensin-(1-7)[Ang一(1-7)]inhibitstheHG—inducedinjurybymodulating theROS—activatedCOX一2pathwayincardiomyocytes．M ethods TheexpressionofCOX一2wasdetectedbyWestern blotassay；Cellvi— abilitywasmeasuredbycellcounterkit (CCK一8)；ThechangesinmorphologyandamountofapoptoticcellsweretestedbyHoechst 33258nuclearstaining； TheintracellularlevelofROSwasassessedbyDCFH—DAstainingandphotofluorography； Themitochondrial membranepotential(MMP)wasanalysedbyJC一1stainingandphotofluorography．Results Co—treatmentofH9c2cariaccellswithHG and1IxmoL／LAng-(1-7)or1000txmol／LN—acetyl—L—cys