改性壳聚糖-明胶网络及在组织工程中的应用.pdf

摘要 摘 要 组织工程是利用生命科学与工程科学的原理和方法，研究和开发具有修复或 改善人体组织或器官功能的新一代临床应用的取代物，用于替代组织或器官的一 部分或全部功能。组织工程的典型方法是在外源性的细胞外基质(ECMs)中种 植细胞组成结构物，在生物反应器中培养扩增，在体外形成新组织后植入患者体 内，与组织整合构建新的功能组织。因此，组织工程采用的外源性EeMs模拟天 然组织的ECMs分子的功能。这种外源性ECMs就是由生物相容性良好和可生 物降解的生物材料制备的三维多孔支架。设计外源性ECMs的最佳方法就是仿 生，即模仿天然组织中ECMs分子的结构与功能，将天然ECMs作为支架使细 胞聚集而构建组织，控制组织结构并调控细胞表型。 本论文从仿生角度出发，对壳聚糖(Cs)一明胶(Gel)网络进行改性，将 和细胞相容性。结果表明，HA的加入使薄膜的亲水性得到了很大的改善，增加 了薄膜的柔韧性。随着HA浓度的增加，薄膜的降解速度越来越慢。Cs—Gel．HA 共混薄膜的细胞相容性要明显好于表面修饰薄膜。HA的浓度只有在一定范围内 (O．01％～0．1％)才可以促进细胞在薄膜上的黏附和生长增殖行为；当HA的浓 度大于0．1％，细胞的黏附和生长增殖受到很大的抑制。 继而采用冷冻干燥技术制各了仿生三维多孔Cs．Gel。HA支架；为了提高天 然聚合物支架材料的力学性能，用不同浓度的合成生物降解材料外消旋构型的聚 用于仿生支架材料高性能化的研究，采用乳液凝固法制备了载粉防己碱的Cs．Gel 微球，将微球与Cs—Gel支架复合制备了载粉防己碱的Cs．Gel支架。对伟q备的仿 生三维多孔支架的理化性能和细胞相容性进行了检测，并将人角质形成细胞与 成纤维细胞在Cs-Gel—HA三维支架材料上共培养，在体外构建了双层人工皮 肤替代物。结果表明，由冻干法制各的三维多孔支架材料分为两层一疏松层和 摘要 的差异。角质形成细胞和成纤维细胞在Cs．Gel．HA支架上共培养3周后可见上 皮层分化趋于成熟，人工真皮与表皮连接处出现IV型胶原表达和断续的层粘连 蛋白的表达，证明此组织工程化人工皮肤已初步具有了基底膜的结构。 最后利用在体外构建的组织工程化双层人工皮肤修复猪背部全层皮肤缺损 模型。实验结果表明，三维Cs．Gel．HA支架材料具有良好的生物相容性，应用 三维Cs—Gel—HA支架材料构建的组织工程化人工皮肤有望成为修复全层皮肤缺 损的人工皮肤替代物，为组织工程化人工皮肤最终的临床应用打下了坚实的基 石出。 关键词：组织工程，仿生，壳聚糖，明胶，透明质酸，聚乳酸，粉防己碱，控释 组织工程化人工皮肤，全层皮肤缺损模型 II 些!!垦生! 一 ABSTRACT methodsoflifesciencesand Tissue utilizes血etheoriesand engineering human and new for clinicsubstitute engineeringsciences．researchingdeveloping cellsin artificialextracellar and is the tissue method typical seeding