骨组织工程中细胞三维培养力学环境分析.pdf

中文摘要 骨组织工程中细胞三维培养力学环境的研究 硕士研究生：徐晓莹 指导教师：张西正 摘要 研究目的： 用于模拟骨组织工程中种子细胞在支架材料上三维培养的力学环境，并计算种子细胞与支 架材料复合物的局部应变值；选用牛松质骨制各组织工程支架材料，负载成骨细胞在体外 三维培养，并对种子细胞与支架材料复合物动态施加l 应变，研究成骨细胞在此生理范围的力学刺激下的生物学响应，验证建模计算的结果，以 探索通过工程建模分析来研究骨组织工程中微观力学环境和生物学响应的可行性。 内容与方法： 骨重建和骨塑建的力学响应机制表明，力学因素在骨的组织工程化构建中起着十分重 要的作用。在骨组织工程中，外部力学载荷导致种子细胞和支架材料复合物内部的力学微 环境发生变化，对细胞的增殖、迁移、细胞外基质的合成、细胞因子及激素分泌能力以及 骨髓问充质干细胞的分化方向等起着重要的调控作用。因此，在骨组织工程构建过程中， 细胞三维培养的力学微环境是有待深入研究的重要内容。近年来引入的三维有限元分析方 法以及非侵入性高分辨率的Micro．CT影像技术使在细观层次上进一步探索培养物内部的 微观力学条件成为可能。在此基础上对组织工程化骨内部的应力应变进行定量分析，在许 多方面都具有重要的作用，例如研究由于骨质疏松、骨性关节炎、体内植入物降解以及细 胞的活动造成的骨重建过程而引发的骨失效机制。 脱钙骨基质能够促进细胞的黏附、增殖和分化，并且具有诱导成骨作用。利用Micro．CT 对制各的支架材料进行扫描，获得该种支架材料的二维连续断层图像，同时，扫描过程中 surface 测量并提取被测样品的以下结构参数：骨体积分数(BV／TV)、骨表面积体积比(Bone ／bonevolume ratio，BSmV)、骨小梁厚度(Trabecular Number)结构模型指数 number,-rbN)、轴向平均截距(MIL)、欧拉值(Euler (Trabecular Model (StructureIndex，SMI)和各向异性程度(degree 显著性差异。 生物体的建模…直是困扰生物力学分析的难题，因为生物体的模型非常复杂，通常的 CAD软件建模需花费大量的时间，且只能对规则形状数模进行建模。目前专用于医学影 像数据三维建模的软件已经可以在一定程度上解决该问题，这类软件是基于医学影像设各 中文摘要 MR的三维数模数据融合可构建复杂模型，同时，能够通过支架材料的灰度值计算弹性模 量，这使生物建模不再依赖于建模时各向同性的理论假设，提高了建模的精确度，结果优 于已有的以均一性假设为前提的研究。 为了模拟种子细胞与支架材料复合物培养过程中的力学环境，本研究采用有限元方 法，在力学分析软件中分别对两组重建模型施加与生物实验相同的1000lae和2000J．te的表 观面载荷，完成计算，并得到支架材料模型内部的应变分布云图。 在本研究的生物实验中，以脱钙松质骨作为组织工程支架材料，负载成骨细胞在体外 三维培养，采用自行研制的压载设备对细胞与支架材料的复合物进行力学刺激，细胞培养 单元的实际工作应变大小和频率均可事先设定，也可以实时电脑控制，在可输出的应变范 围O以500炉内可精确监测。 的力学刺激，加载频率为3Hz，每天加载8分钟，于第五天检测细胞的生物学响应。 研究结果： 本研究制各的牛松质骨经过一系列理化处理，具有天然孔隙结构，机械强度或弹性模 量与天然组织相符，实验证实细胞多方向生长，具有较高的生物相容性和生物安全性，因 此是良好的骨组织工程支架材料。 结构参数为评价牛松质骨支架材料的结构、力学特性提供了重要的参考。研究结果表 明，除欧拉值外，样品的其余四个参数均服从正态分布，牛松质骨作为支架材料其力学特 性稳定，结构差异不大，具有良好的力学强度，结构的各向异性程度较小。 本文探索了对CT扫描二维断层图像重建的模型进行网格划分和优