海洋细菌1202胞外多糖分析.pdfVIP

摘要 摘 要 本文是在对厦门海域潮间带分离的放线菌和细菌胞外多糖的产 量和生物活性筛选的工作基础上，选择了一株海洋细菌1202，对其 胞外多糖的产生、性质、生物活性以及菌株的分类地位进行较为深 入系统的研究。 ／利用乙醇分级、CTAB沉淀和DEAE一纤维素DE22离子交换柱 层捉等分离纯化技术，从菌株1202发酵液中分离纯化到单一纯多糖 PEPS。用Sephadex G200柱层析测得纯化多糖的分子量大于 100，000。组成成分分析表明PEPS是由葡萄糖和葡萄糖醛酸组成， ～一者摩尔比是6．1：1．0，多糖红外光谱、核磁共振1H和”C谱分析揭 示了PEPS糖苷键类型是B型。对乙醇分级多糖级分III免疫活性检 测表明，该组分在10mg／kg剂量即可对抗环磷酰胺的免疫抑制作用， 能够显著地促进机体的非特异性免疫、增强小鼠迟发性变态反应 (DTH)和提高小鼠机体的体液免疫能力。该多糖级分在体内对小 鼠s—180实体瘤也具有显著的抑制作用，抑瘤率达到36．6％，小鼠死 亡率比对照组下降了668％。动物实验结果还显示了该级分腹腔注 射和口服均具有免疫增强活性，这说明经乙醇分级获得的部分纯化 多糖即可用于制备口服免疫增强剂或生物反应调节剂(BRM)。另外， 1202胞外多糖经DEAE一纤维素DE22柱层析后的多糖纯品仍具有较 强的免疫调节活性，说明分离纯化的多糖为活性组分。 采用响应面方法对1202菌株胞外多糖发酵条件的研究表明，该 菌株产生胞外多糖的适宜发酵培养基为：蔗糖4％，酵母膏0．05％， 玉米浆1．5％，CaCaO．1 0．05％，Fes04．740 j％，K也P040．08％，Mgs04．7H20 基装量，28℃发酵7天，胞外多糖的产量可达到8．3mg／mL，糖转化 率为20．75％。 综合1202菌株的形态、培养特征和各项生理生化鉴定结果，该 菌株隶属于土壤杆菌属(Agrobacterium sp)。菌株最适生长的NaCI浓 0，类似海洋的盐度和pH，表明该菌株具 度和pH分别为3％和pH8 有明显的海洋特征。1． ～ } 关键词：葡聚糖、海洋细菌、免疫活性 Abstract Ⅱ Oilthe marine Study exopolysaccha“de producedby 1202 bacteriam ABSTRACT Basedontheresultsofthe forthe and screening production of activitiesthe froma number great immunological exopoIysaccharides the of and wereisolatedfrom intertidal bacteria，which actino