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转bar基因稻喂养小鼠的食用安全性评价
摘 要
本文从分子生物学方向检测了Bar68.1稻谷中外源基因和外源蛋
白在小鼠体内的残留情况,并对外源蛋白的消化稳定性及小鼠小肠
mtDNA的突变性作了较系统的检测。
(1)试验将60只18-249区间的昆明小鼠分为转基因及对照两
个小组,同时喂食配制好的转/常饲料90d,之后从中随机抽取小鼠,
利用设计好的特异性引物对已经提取出的肝脏、肾脏、脾脏、小肠及
腿肌的基因组DNA进行PCR扩增,检测结果显示在小鼠器官组织内
没有发现外源基因片段,说明转Bar基因稻谷中的重组DNA没有在
小鼠体内残留或转移。
(2)采用酶联免疫吸附反应法检0H,0Bar基因表达产物膦丝菌素
乙酰转移酶(PAT)在小鼠的器官组织和消化道内的残留情况,试验
结果未发现样品中存在PAT酶,消化道内(除胃外)不同部位的内
容物也不存在Elisa显色反应,表明PAT酶能够在较短时间内被机体
完全消化降解掉。
(3)提取Bar基因及对照稻谷的蛋白后,参照农业部规定进行
模拟体外消化稳定性试验,试验结果显示Bar68.1及D68稻谷的相关
蛋白在模拟胃肠液环境中很快便消化降解掉,由此可见:转/常稻谷
表达的蛋白产物不具备消化稳定性。
12S
(4)设计4对引物特异性扩增小鼠小肠mtDNArDNA和16S
rDNA序列区间,PCR产物送往上海生工进行正、反向测序,将测序
结果与NCBI数据库比对后发现序列一致,未出现任何突变的情况,
rDNA和16S
表明Bar没有对小鼠的小肠mtDNAl2SrDNA的保守区
域造成突变影响。
结论:在本试验条件下,未发现转Bar基因抗除草剂稻谷对小鼠消化
系统的结构与功能造成明显影响。
关键词:稻谷,小鼠,Bar,外源基因,外源蛋白
ABSTRACT
Molecular
methodswereusedinthis fortheresidue
biology study
detectionofthe andtherelated inBar68—1
foreigngene expressedprotein
GM ofthe and mutation
rice.Digestionstabilityforeignproteingenetic
of
mtDNAfromsmallintestinewerealsostudied.
KMmice between18and were intotwo
(1)60 weigh 249 separated
test andthecontrol ofwhichwereraised
groups:thegroup one,both by
the feed.After90 wereselected for
Configured days,samples randomly
the test PCR inthemice
foreigngeneby respectively
smallintestineand
crureus.Therewasno resultsinallabove
positive
meansthe wasn’tremainedortran
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