高通量低能量激促凋亡过程中survivin对细胞自我保护机制的研究.pdfVIP

L—— 中文摘要 高通量低能量激光促凋亡过程中 Survi Vj n对细胞自我保护机制的研究 专业名称：生物物理学 申请者名称：储冀汝 导师姓名：邢 达 摘要 laser irradiation，LPLI)，以前又称低强度或低 低能量激光照射(Low．power 功率激光照射，作为一种无损的物理手段可以调控多种生物过程，比如细胞增 殖和分化，细胞活力，以及细胞凋亡。LPLI在相对低的剂量下对细胞增殖有一 个刺激效应，但在高剂量则有一个抑制效应。近期研究表明，60～120J／cm2的 LPLI剂量能够诱导肺腺癌细胞凋亡，并且这种诱导作用是激光剂量依赖的。众 所周知，当一个稳定的生物系统(例如细胞)受到外界刺激的时候，会表现出 fluence 一种自我保护效应，来抵抗外界刺激。但是高通量低能量激光(High laser low-power 未被研究。这种机制的研究对于HF．LPLI将来可能的临床应用是必要的。因为 细胞自我保护作用。因此，我们对于survivin在HF．LPLI刺激下活性的变化以 及其抗凋亡作用的发挥进行了研究。 研究方法及结果如下： l，HF．LPLI能够通过ROS／cdc25c／CDKl通路激活survivin 本文使用western 磷酸化水平的变化。实验结果表明，在HF．LPLI处理后l小时，survivin 中文摘要 blot技术，我们在 的磷酸化水平即活化水平显著上升。然后，同样利用western 的磷酸化水平。结果显示，ROS清除剂或者CDKl抑制剂都显著地抑制了 激活survivin，并且这种激活作用是依赖于ROS产生以及CDKl的活性。 2， 性的下降则促进了凋亡。 首先，我们应用流式细胞术检测了瞬时转染的转染效率。结果表明，瞬时 转染的效率大于40％，是一个有效地蛋白过表达方法。之后，我们应用western 检测、流式凋亡检测以及克隆形成检测这三种方法，研究了过表达 加了凋亡率以及处理效力。这些结果说明，survivin活性的上升抑制了HF．LPLI 诱导的肿瘤细胞凋亡，而survivin活性的下降则促进了凋亡。 3， survivin能够延缓HF．LPLI诱导的线粒体去极化，细胞色素C释放， caspase．9以及Bax的激活。 我们应用单个活细胞的实时监测技术、流式细胞术、多细胞荧光光谱分析 以及荧光共振能量转移技术研究了survivin对于HF．LPLI诱导的关键凋亡事件 的影响。研究结果显示，survivin延缓了HF．LPLI诱导的线粒体去极化、细胞色 素C释放、caspase一9以及Bax的激活。 综上所述，在HF．LPLI诱导的肿瘤细胞凋亡过程中，survivin介导了细胞自 我保护作用。 关键词：高通量低能量激光照射；survivin；凋亡；细胞自我保护 II 英文摘要 l 0N STUDYONTHEMECHANI SM0FSELF—PROTECT MEDl ATEDBYSURVI VI NDURl NGCELLAPOPTOSI SI NDUCEDBY I GH I RRADl AT1 H FLUENCELOW-POWERLASER 0N Major：Biophysics