贝特类药物在大和人肝微粒体中的ⅰ相和ⅱ相代谢.pdf

摘 要 摘 要 通过调节过氧化物酶体增殖活化受体α,贝特类药物被广泛应用于血脂异常 的治疗。作为一类药物，贝特类药物的活性形式都有一个羧基，便于被Ⅰ相和Ⅱ 相酶所代谢。然而，在对药物进行体外代谢研究的过程中，二相代谢的贡献常常 被忽略，所以用体外的筛选体系同时检测Ⅰ相和Ⅱ相酶的代谢去推测体内的清除 情况的研究还不是很成熟，仍然具有挑战性。本课题研究了经常使用的几个贝特 类药物（吉非罗奇、氯贝特、菲诺贝特、本扎贝特）在大鼠和人的肝微粒体中的 代谢稳定性。三个不同的反应体系通过单独或者同时添加代谢酶的辅助因子 NADPH和UDPGA来启动细胞色素P450酶和UGT酶介导的生物转化。利用底物消 除法，测定了该类药物在大鼠肝微粒体中的表观酶动力学参数：米氏常数Km 、 最大反应速率Vmax和固有清除率CLint。贝特类药物中的Gem，在一相氧化代谢 反应体系里的表观Km 、Vmax以及CLint分别为 11 ±4µM 、1861±967 nmol/min/mg 、 172 ±22µl/min/mg 。Gem葡萄糖醛酸结合反应的表观Km值和一相 反应中的Km值相当（11±1 µM）。但是二相代谢反应体系中的Vmax （6993 ±1183 nmol/min/mg ）和算得的CLint （643 ±26 µl/min/mg ）值要比一相反应体系中的高 5倍左右，说明在Gem的代谢过程中，二相代谢途径比一相代谢途径更为重要。 在一相和二相联合代谢反应体系中，Km值（8 ±3 µM ）在三个体系中是最小的， Vmax值（6100 ±3041 nmol/min/mg ）与二相代谢反应体系中的Vmax值差不多， 然而CLint值（798 ±103 µl/min/mg）是三个体系中最大的。通过同样的方法，求 得贝特类药物中的另一个药物CPIB在一相代谢、二相代谢、一相和两相联合代 谢三个反应体系中的Km 的值分别是0.04 ±0.004 µM、2 ±1µM、2 ±1µM。Vmax 在三个反应体系中的值分别为 2.3 ±0.3nmol/min/mg、163±113 nmol/min/mg、 64 ±49 nmol/min/mg 。相对应的CLint值分别是43 ±11 µl/min/mg、88 ±12 µl/min/mg、119±15 µl/min/mg。其他研究的贝特类药物的固有清除率非常低。 在NADPH和UDPGA启动的一相反应和二相反应在吉非罗奇代谢清除过程中的 贡献研究中，我们发现P450介导的途径占P450与UGT联合介导的途径的22% ， I 摘 要 UGT介导的途径占81%。同样的，在氯贝特酸的代谢中，P450和UGT介导的途径 分别占P450与UGT联合介导的途径的36%和74% 。这些数据说明，单独监测 NADPH或者UDPGA依赖的通路都可能会导致一定的偏差，不能代表体内的实际 的生物转化情况，因为它们是相互竞争的通路。我们还发现，尽管清除速率存在 种属差异，但不管在大鼠肝微粒体还是在人肝微粒体中Ⅱ相通路都是贝特类药物 的主要代谢通路。 关键词：细胞色素P450 酶 葡萄糖醛酸转移酶 代谢 酶动力学 清除率 贝特类 药物 II Abstract ABSTRACT Fibrates are widely used for the treatment of dyslipidemia mediated by peroxisome proliferative activated receptor α. As a class of drug, the active form of fibrates has a carboxyl-group, and ready for metabolism by phase I and phase II enzymes. However, the contribution of pha