白介素13和溶磷脂酸对人肝星状细胞合成ⅰ型和ⅲ型胶原的影响.pdf

唧rl l f IIII IIl[1l l[1l{ Y1 747020 摘要 摘要 目的： 细胞)产生的具有多效能的免疫调节细胞因子。它可以调节炎症、黏液的产生、 组织重建和纤维化。IL一13在肝纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、肺纤维化等纤 促纤维化作用，因此它是纤维化疾病治疗的重要靶点。 acid，LPA)是一种细胞膜脂类衍生物，是已 溶血磷脂酸(Lysophosphatidic 知最小、最简单的甘油磷脂分子。LPA由成纤维细胞、血小板、脂肪细胞、癌 细胞等分泌，是一种重要的细胞丝裂原素，它的作用多样化。它具有促进血管 平滑肌收缩、促进血小板聚集等作用，也可以抑制细胞的增殖和胶原的合成。 本实验主要检测IL．13是否能促进人肝星状细胞胶原的合成，溶血磷脂酸 (LPA)是否能下调人肝星状细胞胶原的合成，为临床上肝硬化等纤维化疾病提 供治疗的理论基础和实验依据。 方法： 1．台盼蓝染色检测肝人星状细胞LX-2的活性。 2．HE染色观察LX-2细胞的形态。 I，PCOLI)、 4．检测IL一13刺激LX一2细胞对I型胶原(Procollagen type III型胶原(Procollagen LX．2细胞对I型胶原(PCOL I、PCOL 用不同浓度LPA在不同时间刺激LX．2细胞，RT-PCR检测PCOL 组，RT-PCR检测PCOLI、PCOLIIImRNA的表达。 5．免疫组化检测I型胶原蛋白的表达。分四组：空白组、IL．13组、LPA 和IL．13混合组以及LPA组。 摘要 结果： 1．LX-2细胞活性良好，而且IL一13和LPA对细胞无毒性作用。 2．HE染色观察LX-2细胞为星状，细胞核呈圆形或椭圆形。 Q 胞表达IL-13RlmRNA无影响。 I、PCOLIIImRNA表达上 4．RT-PCR检测显示，IL一13刺激LX一2细胞后，PCOL 调。 5．0．1 u M I、PCOL[IImRNA表达与空白对照组相比无明显变化。luM、10u LPA刺激24h 后，LX一2细胞PCOL PCOLIIImRNA的表达均高于空白对照组，而LPA组的表达均低于空白对照组。免 I蛋白表达结果与RT—PCR结果一致。 疫组化检测PCOL 结论： 1． IL．13、LPA刺激LX．2细胞对IL．13Ral的表达没有影响。 2． IL．13上调LX．2细胞PCOLI、PCOLIII的表达。 I、PCOLIII的表达。’ 3．LPA在达到一定的浓度时下调LX．2细胞PCOL 关键词： IL-13；溶血磷脂酸； 肝星状细胞；I型胶原；III型胶原 Abstract ABSTRACT Objectives： Interleukin-13isa immune whichis pleiot