黑土长期定位试原状土搬迁对土壤微生物的影响.pdf

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2015-11-06 发布于贵州
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黑土长期定位试原状土搬迁对土壤微生物的影响

目录摘要…………………………………………………………………………………………………………………………．I 英文摘要………………………………………………………………………………………．III l前言…………………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1土壤微生物影响因素……………………………………………………………………．1 1．1．1土壤类型……………………………………………………………………………．1 1．1．2植被类型……………………………………………………………………………．1 1．1．3季节变化……………………………………………………………………………．1 1．1．4土地管理措施………………………………………………………………………一2 1．1．5施肥……………………………………………………………………………………………………………．．3 1．2土壤微生物多样性的研究方法…………………………………………………………一4 1．2．1微生物平板记数法……………………………………………………………………5 1．2．2磷脂脂肪酸(PLFA)分析法…………………………………………………………5 1．2．3分子生物学方法………………………………………………………………………6 1．2．4 Biolog微平板方法…………‰……………………………………………………一7 1．3本研究的目的与意义……………………………………………………………………7 1．4本研究的技术路线………………………………………………………………………8 2材料与方法……………………………………………………………………………………9 2．1试验设计及供试土壤……………………………………………………………………9 2．2仪器设备………………………………………………………………………………．10 0 2．3试剂…………………………………………………………………………………………………………………1 2．3．1主要试剂及缓冲液…………………………………………………………………10 2．3．2主要培养基…………………………………………………………………………12 2．3．3 PCR反应及DGGE电泳试剂………………………………………………………12 2．4测定方法………………………………………………………………………………．13 2．5PCR—DGGE测定土壤微生物多样性…………………………………一………………～13 2．5．1基因组DNA提取…………………………………………………………………一13 2．5．2基因组DNA的PCR扩增…………………………………………………………．14 2．5．3 PCR产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)…………………………………………15 2．5．4 DGGE图谱中代表性条带的克隆和测序分析………………………………………16 2．6数据分析………………………………………………………………………………．16 3结果与分析…………………………………………………………………………………．17 3．1搬迁前后土壤可培养微生物数量变化…………………………………………………17 3．1．1细菌数量变化………………………………………………………………………17 3．1．2真菌数量变化………………………………………………………………………17 3．1．3放线菌数量变化……………………………………………………………………18 万方数据东北农业大学理学硕士学位论文 3．2搬迁前后土壤微生物量变化……………………………………………………………19 9 3。2。