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- 2016-09-22 发布于重庆
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用于检测和定量分析极性细胞代谢物的一种新颖的HILIC LCMS方法.doc
用于检测和定量分析极性细胞代谢物的一种新颖的HILIC LC-MS方法
来源:沃特世公司 阅读数:61 时间:2011-04-20 引言
复杂生物样品通常包含大量可反映有机体代谢状态的内源性代谢物。特别是骨骼肌可根据其是快收缩肌(白色肌肉,糖酵解型)还是慢收缩肌(红色肌肉,氧化型)而表现出特征性的代谢组“指纹图谱”。例如,红色肌肉应显示一种富含线粒体代谢物(如三羧酸循环)的代谢组指纹图谱;而白色肌肉应显示富含糖酵解代谢物的代谢组指纹图谱,其线粒体代谢物的浓度大大低于红色肌肉。虽然很多这类代谢物可具有较强的极性,但这些样本通常使用反相液相色谱-质谱(RP-LC-MS)进行分析,由此而来的多是较差的保留。在本研究中,我们开发了一种用于检测和定量强极性细胞代谢物的新颖LC-MS方法。本研究采用了基于亚2微米颗粒BEH酰胺柱的亲水作用液相色谱(HILIC),并联用了杂化四极杆飞行时间质谱仪和三重四极杆质谱。
方法
这些试验借助联用了沃特世SynaptTM HDMSTM、沃特世Synapt G2 HDMS和Xevo TQ的一台UPLC系统而进行:
液相色谱条件(1):使用碱性流动相
液相色谱系统:沃特世ACQUITY UPLC?系统
- 色谱柱:ACQUITY UPLC BEH Amide 酰胺基柱,2.1×100mm,1.7μm
- 柱温:45℃
- 流速:500μL/分钟
- 碱性流动
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