高效液相色谱柱的保护.docVIP

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  • 2016-09-22 发布于重庆
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高效液相色谱柱的保护.doc

高效液相色谱柱的保护1、最好用预柱。(但要注意,若有时出峰异常,要先看看是不是它有问题了) 2、每次做完分析,都要进行冲洗, 分析用流动相中若无酸、碱、盐类物质,建议用90%甲醇冲洗30~60min; 若分析用流动相中含以上物质,要先用10%甲醇(或用与分析用流动相同比例,把含酸、碱、盐溶液换成水)冲洗1小时左右,再梯度走到90%甲醇冲洗30~60min(若用多元泵)。有必要时再循环几次,可以适当缩短时间。 若长时间不用该色谱柱,要冲洗好后,用纯甲醇或乙腈封存。 3、若流动相中用到离子对试剂,更应该好好冲洗,且该色谱柱最好作为专用,不能再做其它物质分析用。因色谱柱填料性质已与原来所不同,在该柱上所摸索的色谱条件,可能在其它同类柱子上得不到重现。 4、尽量避免反冲,除非该色谱柱厂家明确说明允许。 5、普通C18柱尽量避免在40℃以上的温度下分析。 6、定期测柱效,有下降,可以用10%异丙醇甲醇冲洗色谱柱。若柱效还没有改善,可以再生,甲醇-二氯甲烷-甲醇。 1.样品要采用0.22或0.45μm滤膜过滤,流动相采用0.45μm滤膜过滤并脱气。 2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围 3.避免流动相组成及极性的剧烈变化。 4. 避免纯水冲洗反相色谱柱。 5.每次测试完毕,要用20倍柱体积的流动相冲洗色谱柱(分析色谱柱250×4.6mm柱体积3.2ml

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