2015高考生物热点专题精确射靶 热点十四《现代生物科技专题》.docVIP

热点十四 现代生物科技专题 【考点精要】 考点一基因工程 1．基因工程的基本工具1）限制性内切酶分布：主要分布在微生物中作用：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子作用特点：专一性作用结果：产生黏性末端2）DNA连接酶磷酸和五碳糖形成磷酸二酯键（3）载体①作用：将基因细胞②常用的载体：质粒、动植物病毒等。质粒是存在于细菌、酵母菌细胞质内的小型环状DNA2.基因操作的基本步骤 （1）目的基因的①从直接分离基因②人工合成基因反转录法：mRNA单DNA→双链DNA；b.化学合成：氨基酸序列核苷酸序列（3）目的基因导入受体细胞借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径，将目的基因导入受体细胞。（4）目的基因的检测与鉴定 水平 检测 导入 检测转基因生物染色体DNA分子上是否插入了目的基因，采用DNA分子杂交技术 转录 检测目的基因是否转录出了mRNA，采用分子杂交技术 翻译 检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用抗原—抗体杂交技术 个体水平鉴定 进行个体生物学水平的鉴定，如做抗虫或抗病接种实验，以确定是否具有抗性以及抗性的程度；又如，有的基因工程产品需要与天然产品的功能进行活性比较，以确定转基因产品的功能活性是否与天然产品相同。 3.基因工程与蛋白质工程比较 项 目 蛋白质工程基因工程 过程预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列DNA 获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性，获得人类所需的生物类型或生物产品 结果可生产自然界没有的蛋白质 只能生产自然界已有蛋白质 已被广泛应用,转基因植物、动物、药品生产等已商业化,基因治疗尚处于临床试验阶段 联系蛋白质工程是在基因工程基础上，延伸出来的第二代基因工程基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造考点二细胞工程 原理：动物细胞核的全能性。用体细胞核移植技术得到克隆动物，说明动物体细胞的细胞核具有全能性。 供体和受体的选择：（1）供体：一般选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证供体细胞正常的遗传基础。（2）受体：去核的MⅡ中期的卵母细胞。①选取MⅡ中期的卵母细胞的原因：细胞大，易于操作；卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养；卵细胞具备受精能力，细胞质中含有刺激融合后重组细胞进行分裂分化并形成重组胚胎的物质和条件。（3）去核的原因：保证克隆动物的遗传物质最大程度的来自有重要利用价值的动物。 5.植物细胞融合与动物细胞融合 比较项目 植物细胞融合（番茄－马铃薯植株） 动物细胞融合（单克隆抗体） 过 程 第1步 原生质体的制备（酶解法） 正常小鼠的处理（注射灭活抗原） 第2步 原生质体的融合（物理、化学法） 动物细胞融合（物理、化学、生物法） 第3步 杂种细胞的筛选和培养 杂交瘤细胞的筛选和培养 第4步 杂种植株鉴定 提纯单克隆抗体（特异性强、灵敏度高） 理论基础 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶 注射特定抗原法免疫处理正常小鼠 促融因子 物理法：电激、离心、振动 化学法：聚乙二醇、CaCl2等 物化法：与植物相同 生物法：灭活的仙台病毒 意义和用途 ①克服有性远缘杂交不亲和障碍，获得杂种植株；②克服有性杂交的母系遗传，获得细胞质基因的杂合子，是研究细胞质遗传的有力手段 制备单克隆抗体的技术之一，有助于疾病的诊断、治疗和预防 考点三胚胎工程 1.胚胎工程的理论基础 受精过程Ⅰ.准备阶段①精子获能成熟的精子需在雌性生殖道获能后才具备受精能力。②卵子的准备动物排出的卵子到减数第二次分裂中期时才具备与精子受精的能力。 Ⅱ.受精阶段精子穿越放射冠和透明带（顶体反应）精子穿越卵黄膜（精子外膜和卵黄膜融合）雌雄原核形成（排出第二极体）雌雄原核融合完成受精作用，形成受精卵。 Ⅲ.防止多精入卵的屏障①透明带反应，是防止多精入卵的第一道屏障②卵黄膜封闭作用，是防止多精入卵的第二道屏障。 （2）早期胚胎发育受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚2．体外受精和早期胚胎培养 （1）卵母细胞的采集和培养：从输卵管中获取的卵子，可直接与获能的精子在体外受精；从卵巢中获取的卵母细胞，要在体外经人工培养到减数第二次分裂中期，才能与获能的精子受精。 （2）精子的采集和获能：用不同的方法采集的精子，要放入获能液中培养或用化学药物诱导，使精子获能。 （3）体外受精和胚胎的早期培养：获能的精子和培养成熟的卵子在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程，然后移入发育培养液中继续培养一段时间，经检查发育