高考生物二轮专题复习 第一篇 7-3 基因工程与克隆技术专题整合演练提升.docVIP

专题三　基因工程与克隆技术 (时间：30分钟)考点一　基因工程 1．(2014·福建质检)为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图：(Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达) 请回答： (1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，______(需要/不需要)启动子。 (2)步骤②中，用Ca2＋处理大肠杆菌，使之成为______细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有______基因。 (3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断______(蓝色/白色)菌落中的大肠杆菌为重组菌。 (4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与__________________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。 解析　(1)由图可知，SHH基因插入在LacZ基因中，LacZ基因被SHH基因插入后不表达，所以要使SHH基因表达就需要启动子。 (2)大肠杆菌细胞用Ca2＋处理后就称为感受态细胞；要在添加氨苄青霉素的培养基上生存，一定要含有抗氨苄青霉素基因才可以，没有抗氨苄青霉素基因将会死亡。 (3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，重组菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表达，含有IPTG和X－gal的培养基上会形成白色菌落。 (4)判断SHH基因的转录情况，也就是判断SHH基因是否转录出mRNA。 答案　(1)需要 (2)感受态　Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性) (3)白色 (4)SHH转录的mRNA(只写mRNA不可) 2．(2014·山东潍坊一模)下图表示转基因烟草的培育过程。请据图回答： (1)图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是______________，若将外源基因导入动物细胞，目前采用最多、最有效的是__________技术。 (2)为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，携带外源基因的质粒上应有__________，还应有__________，以利于外源基因的表达。 (3)该过程中用到的植物细胞工程技术是____________，这项技术应在________条件下进行，依据的生物学原理是__________________。 (4)外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测_________________，其次采用分子杂交技术检测______________________，最后通过抗原—抗体杂交检测__________________。 答案　(1)农杆菌转化法　显微注射 (2)标记基因　启动子和终止子 (3)植物组织培养　无菌　细胞的全能性 (4)转基因生物的DNA上是否插入了外源基因　外源基因是否转录出了mRNA　外源基因是否翻译成蛋白质 考点二　植物细胞工程 3．(2014·山东临沂质量检测)如图为利用基因工程培育花卉的过程(字母代表相应的物质或结构，数字代表过程或方法)。请回答： (1)花卉基因工程可细分为花色基因工程、花形基因工程、香味基因工程等，不同的基因工程所需要获取的________不同，①过程需要的酶有________。 (2)基因工程中最常用的运载体是________，另外还有________、动植物病毒等。整合了目的基因的重组质粒，在组成上还含有启动子、终止子和________。 (3)②过程常用的方法是____________，检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，需要采用________技术。 (4)外植体一般从受体植物的形成层处获取，原因是这部分细胞容易________。由外植体培养为转基因植株的③、④过程为________，该过程的理论基础是____________。 (5)人工种子就是以形成b之后得到的________、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。 解析　(1)花卉基因工程可细分为花色基因工程、花形基因工程、香味基因工程等，不同的基因工程所需要获取的目的基因是不同的，①过程是基因表达载体构建过程，此过程需要用同一种限制酶切割目的基因和运载体，使它们露出相同的末端，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体。(2)常用的运载体：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒，质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因等。(3)②是转化目的基因过程，受体细胞是植物细胞，常用农杆菌转化法，转基因生物的DNA上是否插入