水稻矮秆基因d-ss的遗传分析与克隆（原版论文）.pdfVIP

第 52卷 第 5期 厦门大学学报 (自然科学版) Vo1．52 NO．5 2013年 9月 JournalofXiamenUniversity(NaturalScience) Sep．2013 水稻矮秆基 因d-ss的遗传分析与克隆 ， 罗茂春 。，赵 政 ，夏 令 郭迟鸣 ，陈 亮 (1．厦门大学生命科学学院，厦门市植物遗传重点实验室，福建 厦门 361102；2．龙岩学院生命科学学院，福建 龙岩 3640l2) 摘要 ：通过 7射线诱变，从粳稻品种 9522的M 代中筛选出一株矮秆水稻(OryzasativnL．)突变体，定名 ss突变 体表现为叶色深绿、短宽的叶片、以及小而圆的籽粒 ．以d-ss突变体与籼稻品种龙特普杂交的F。代群体为基 因定位群 体 ，利用 InDe1分子标记将 d-ss突变位点定位在 5号染色体上的 InDel标记 ZZ5—6和 ZZ1343之间，物理距离为 412kb． 最终通过 图位克隆的方法获得了此基因，测序结果表明此基因在编码 区发生了两处缺失突变． 关键词 ：水稻；矮秆；基因定位；图位克隆 中图分类号 ：Q943 文献标志码 ：A 文章编号：0438—0479(2013)05—0684—06 株高是农作物一个十分重要 的农艺性状 ，高秆 作物因植株过高容 易引起倒伏 ，而半矮秆 品种具有 1 材料与方法 耐肥 、抗倒、高产等优 势．水稻 (OryzasativaL．)sdl 基因和小麦 Rhtl基 因在育种 中的大规模推广应用 1．1 突变体的获得ll6] 使世界主要粮食作物产量极大 幅度地提高 ，这一历 实验材料水稻矮化突变体 由上海交通大学张大兵 程即为众所周知 的 “绿色革命”． 教授惠赠．该突变体通过 280Gy的。Co7射线照射粳稻 在水稻中已经报道的(半)矮秆基因有 70多个 ，但 (Oryzasativassp．japonica)品种 9522获得．遗传学分 目前 只有半矮秆基 因 sdl[1和矮秆基 因 _2]、 l3]、 析表明该突变体属于单位点隐性突变．取 M。代与籼稻 dl8l4j、d61[5等少数基 因被克 隆．现真正在水稻育种 ((]lsativassp．indica)品种龙特普杂交，得到F代种子 ， 中发挥作用的只有 sdl，其余大多数 尚未在育种方面 自交后得到F代分离群体，取矮化植株用于基因定位． 应用，因而可能潜伏着遗传背景单一带来的风险．此 1．2 水稻基 因组 DNA与 RNA的提取 外 ，新育成矮秆品种产量潜力停滞不前 的现状还可能 基因组 DNA 提取采用 十六烷基 三 甲基溴化 铵 与矮秆基因利用单一化有关．因此，发掘和鉴定控制水 (cety|triethylammonium bromide，CTAB)法 ，做 了 稻株高的基因，开展矮秆基因定位、克隆及作用机理等 方面的研究，实现对水稻株高的定向遗传改 良，具有十 部分调整．水稻总 RNA 提取采用 Trizol试剂 (购 自 Invitrogen公司，提取方法参见 Trizol试剂说明书)． 分重要的理论意义和应用价值． 为深入 研究水 稻茎秆发 育的机理 ，将粳 稻品种