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植物转基因育种技术
转基因育种的概念与优点 转基因育种技术的一般操作过程 转基因育种技术的应用成果 转基因的安全性 第二节 植物转基因技术的一般操作过程 1.目的基因的分离 (1)已知基因的获得 ①化学合成法 ②PCR扩增 (2)未知基因的获得 ①构建基因组文库,筛选目的基因 ②构建cDNA文库,筛选目的基因 ③mRNA差异显示技术筛选差异表达基因 ④差异蛋白质谱表达技术筛选功能基因 …… 3.受体材料的准备 细胞的全能性:分化细胞脱分化 再分化 4.遗传转化 (1)间接转化法——农杆菌介导转化法 (2)直接转化法 A、 基因枪转化法 B、 电击法 C、花粉管通道法 D、 PEG介导基因转化法 PEG介导基因转化的主要原理是聚乙二醇(PEG)、多聚-L-鸟核苷酸(pLO)、磷酸钙及高pH值条件下诱导原生质体摄取外源DNA分子.PEG可促使细胞膜与DNA间接触与粘连,并通过引起膜表面电荷的紊乱及干扰细胞间的识别,利于细胞膜间的融合以及外源DNA进入原生质体. 表1 几种植物转基因方法比较 5.转化组织 ——农杆菌介导之叶盘转化法 6.炼苗 国外对转基因食品管理的现状 1. 国际组织 实质等同原则 表型性状的等同 成分等同 2000年《卡塔赫纳生物安全协定书》62个国家签署 2001年《生物安全议定书》 130多个国家签署 2003年《生物技术食品的风险评估草案 》226个国家表示欢迎 2. 美国 ◆ 1992年美国公布了转基因作物不需由作市场前评价,除非它引起新的安全性问题。2000 年4月,在国会科学委员会下属的基础研究委员会的调查报告中,坚持认为没有科学的证据之前不能将GMF作为一个新的食品级别 ◆ 2000年1月美国政府对转基因玉米的种植颁布了限令,以防止害虫对转基因玉米中毒素形成抗药性。美国环境保护局限令美国大部分玉米产区的农场主应至少种植20%的传统玉米,在同时种植玉米和棉花的地区,传统玉米要达到50% ◆2001年7月出台了《转基因食品管理草案》规定,来源于植物且被用于人类或动物的GMF在进入市场之前至少120天,生物工程制造商必须提出申请,并提供此类食品的相关资料,以确认此类食品与相应的传统产品相比具有等同的安全性 3. 欧盟 ◆欧盟对GMF持反对态度,1998年提出转基因技术安全性之后,其反对态度更加强硬。他们对转基因技术培育的农作物、家畜以及再加工食品加以抵制,尤其对美国的转基因玉米已终止了进口,然而对于西班牙和德国的转基因玉米却没有采取措施 ◆欧盟的法律由两项:欧盟理事会90/220令,于1990年4月颁布实施,该法令中规定了转基因生物的批准程序;1997年5月《新食品法》规定对转基因产品必须加贴标签 4. 其它国家 ◆日本、澳大利亚、俄罗斯、加拿大、韩国、泰国、 巴西的政策基本与国际组织的相同,但是巴西最 近宣布在未查清转基因作物对环境的影响之前, 暂时停止种植转基因大豆。 ◆发展中国家迫切需要解决粮食问题,对于高产的转基因产品表示欢迎,这些国家技术落后,没有相关的转基因成分的检测条件,对于标识问题也只能处于被动地位,基本是按国际组织的要求和《生物安全议定书》要求执行 我国对转基因食品的对策 ◆ 1993年12月24日,国家科委颁布实施了《基因 工程安全管理办法》 ◆ 1996年7月10日,国家农业部颁布实施了《农业 生物基因工程安全管理实施办法》 ◆ 2001年6月6日国务院颁布了《农业转基因生物安 全管理条例》 ◆ 2002年4月8日国家卫生部颁布了《转基因食品 卫生管理办法》 由中国农科院生物工程中心开发的Bt棉对棉铃虫有显著的抗性。与对照相比减少农药用量80%,并减少用工150个/hm2,以上两者可使每公顷节省1500元,Bt转基因棉种深受棉农的欢迎。 第四节 转基因作物的生物安全性 直至今天,转基因作物的安全性在全球范围内引起了激烈的争论。 反对者认为转基因作物具有极大的潜在危险,可能会对人类健康和人类生存环境造成威胁。 在欧洲,转基因作物被一些媒体称之为“恶魔食品”(frankenstein food)。 Frankenstein是英国科幻小说中由一个科学家创造、最终又毁灭了这个科学家的怪物。那么,人类研制与种植转基因作物到底是毁灭自己,还是拯救自己呢? 对转基因作物的安全性争论,国际上有几个典型的事件。 Pusztai事件: 英国Rowett研究所有位Pusztai博士,他用转雪花莲凝集素基
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