GMCSF对抗原化抗体基因免疫TH细胞应答的调节作用.pdfVIP

维普资讯 2oo5．Vol25．No．2 · ll6 · 华微生物学和免疫学杂老 生 筮堑鲞笠 ． 抗 体工 程 ． GM—CSF对抗原化抗体基因免疫 TH细胞应答的调节作用 夏明灿 储以微 林怡 熊思东 【摘要 】 目的 研究GM—CSF(粒．单核巨噬细胞集落刺激因子)与抗原化抗体联合基因免疫时， GM—CSF对 TH细胞应答的调节作用。方法 在编码免疫球蛋 白重链的质粒 中分别克隆黏蛋 白1 (MUC1)中特异性PUIRP抗原表位和GM．CSF编码基因，构建含P阴1RP和 GM—CSF编码基因的抗原化 抗体表达重组体。经脾免疫和肌肉加强的方式免疫 BALB／c小鼠。采用ELISA方法检测小鼠血清中 特异性抗体的水平及其亚类并动态观察；RT-PCR方法检测TH细胞分化中细胞因子和转录因子的表 达水平。结果 抗原化抗体基因免疫能诱导机体产生免疫应答。GM．CSF增强抗原化抗体基 免疫 诱生的抗PUIRP特异性IgG抗体水平并且伴随IgG1／IgG2a显著性升高，同时可增强淋巴细胞TH2 细胞因子及转录因子(IL厂4、GATA一3)mRNA的表达水平。结论 GM．CSF在增强抗原化抗体基因免疫 诱导的免疫应答的同时使得免疫应答向TH2方向偏移。 【关键词 】粒．单核巨噬细胞集落刺激因子；T辅助细胞；抗原化抗体；基因免疫；黏蛋白1 F_,ffeet0fGM—CSFOntheThelpercellresponseinducedbygeneimmunizationwiht anligeniz~lantibody Ming-can，CHUYi-wei，LINYi，XIONGSi—dong，DepartmentofIrrumm~logy， 咖 MedicalCollegeof Fudan University，Shanghai200032，China Corre~ondingal~hor：XIONGSi-dong。Email：sdxiong@shmu．edu．m 【Abstract】Objective ToinvestigatetheeffectofGM—CSFonhteThelperceHresponseinducedby geneimmunization combinde wilhGM—CSFandnatigenizednatibody．Meth0ds A DNA plasmidthatcontains epitopeofmucin1polypeptideP1)rrRPnadirflinllneadjuvnatGM—CSFwasconstructdewi山natigenizednatibody．A specificimmuneresponseagainstPDTRPwaselicitde viaintrasplenicgeneimmunizationnadboostde 、riai．nlgene immunization．TheserawerecoHcetde nad山elevelsofspecificnatibodywere detcetedbyELISA．Theexpressions ofkeymolceulesinTtceHdifferentiationweredeterminde byRT-PCR．Result Th especificimm uneresponse wasinducde bynafigenizde natibody．GM—CSFenhnacedhtelevelsofIgGwiht IgG2a／IgG1ratioincreasingsignifi— cnaflynadhteexpressionofTH2一typecytokinesnadtranscriptionfactors．Conclusino GM—CSFcouldehnnacehte imm uneresponsenadimproveTH2typeimm uneresponseinducdebygeneimm unizationwihtn