《反相高效液相色谱法评价烟台苹果中游离氨基酸》.pdfVIP

第27卷第2期 烟台大学学报 (自然科学与工程版) V01．27No．2 2014年4月 JournalofYantaiUniversity(NaturalScienceandEngineeringEdition) Apr．2014 文章编号：1004-8820(2014)02-0111_o6 反相高效液相色谱法评价烟台苹果中游离氨基酸 姜 宏 ，左利民 ，周 洁 ，邬旭然 ，山广志 (1．烟台大学化学化工学院，山东 烟台264005；2．中国医学科学院医药生物技术研究所 ，北京 100050) 摘要：利用反相高效液相色谱法对烟台境 内多地红富士苹果中游离氨基酸含量进行检测 和分析．色谱条件为：CapcellPAKC18色谱柱(4．6mmx150mm，3Ixm)，以10mmol／L磷 酸氢二钠和 10mmol／L硼酸钠的缓冲溶液(pH8．2)为流动相A，乙腈 一甲醇 一水 (45：45 ：10，We／V)为流动相B，梯度洗脱，流速 1．5mL／min，外标法定量，检测波长为338nm和 262nm．在 l0～l000pmol／ 浓度范围内，17种氨基酸线性关系良好 (R 0．999)，峰面 积的精密度 (RSD)：1．47％ ～3．84％，回收率 91％～1l1％．8种烟台红富士苹果中游离 氨基酸总量为47．0～140．9 g／g，必需氨基酸的含量比例为6．6％一29．5％，不同产地苹 果中氨基酸含量在极差0．O5水平上有显著性差异，对测定值分别进行聚类分析和主成分 分析，8种不同产地的苹果样品可分为3类． 关键词：烟台苹果；游离氨基酸；主成分分析；聚类分析；反相高效液相色谱 中图分类号：0657 文献标志码 ：A 苹果是蔷薇科苹果属植物的果实，营养丰富，具 的氨基酸衍生剂包括邻苯二甲醛 (OPA)、9一芴甲 有多种保健功效．氨基酸是苹果风味的主要组成物 基氯甲酸酯 (FMOC)、异硫氰酸苯酯 (PITC)等．0PA 质，具有增鲜和提高机体免疫力的作用，苹果的质量 具有衍生步骤简单、反应速度快、剩余试剂不干扰测 与其所含氨基酸的种类、含量和组成密切相关 ¨]． 定的特点，将 FMOC与OPA联用可同时检测一级和 微量元素、氨基酸 及糖、可溶性固形物等指标性 二级氨基酸，衍生化反应可在室温下进行，衍生化效 成分采用聚类分析 、主成分分析 等数理统计方法 率高，适合在线衍生 ¨，已广泛应用于食品、医药中 处理后 ，可用于地域性分析及品质鉴别 ． 氨基酸的检测 ”J． 氨基酸的分析方法主要有氨基酸分析仪测定 烟台是我国著名的苹果产地，目前有关烟台苹 法_5J、高效 阴离子交换色谱 一积分脉冲安培法 果中游离氨基酸组成及含量的研究比较少．本研究 (HPAEC—IPAD)[63、气质联用 J、毛细管 电泳 J、 以OPA和FMOC为衍生剂，采用在线衍生一反相高 液质联用 j，这些仪器一般比较昂贵，不利于普及 效液相色谱法，对烟台境 内不同产地及生长环境下 和应用．高效液相色谱法 操作简便、快速、结果准 红富士苹果中游离氨基酸的含量进行测定，采用主 确、价格低廉，已普遍用于多种生物样品内氨基酸的 成分分析和聚类分析对苹果的地域性和品质进行了 检测．由于大多数氨基酸不含生色基团，在高效液相 初步鉴定，为烟台苹果功效成分、地域性及品质特征 色谱法中需要通过衍生化的方法将氨基酸转化为具 的进一步研究提供参考． 有较强紫外或者荧光吸收的衍生物进行测定．常用 收稿 日期 ：2013-09-29 基金项目：科技部新药创制重大专项平合(2012001—019)． 作者简介：姜宏 (1987一)，山东济宁人，硕士研究生． 通信作者：山