异麦芽酮糖的转基因法生产研究.pdfVIP

维普资讯 《中国食品添加剂》 ChinaFoodAdditives 2o04 No．3 异麦芽酮糖的转基因法生产研究 葛亚中 徐俊 (华南理工大学食品与生物工程学院，广州 510640) 摘要：本文探讨了在两种转基因植物中生产异麦芽酮糖的可能性，并指出了需要解决的问题。 关键词：异麦芽酮糖，转基因植物，蔗糖异构酶 StudyonTheProductionofIsomultosebyTransgenicPlants (CollegeofFoodBio-engineering，SouthChinaUniversityofTechnology，Guangzhou510640) Al~raet：Thispaperdiscussedthepossibilityofhteproductionofisomaltuloseintwokindsoftransgenic01nats，andpointedout hteproblemshtatneedtobesolved． Keywords~Isomaltulose，Transgenicplant，Sucroseisomerase 异麦芽酮糖(Isomahulose，6．0心D．吡喃葡糖基． 中大量存在，而且植物生产面积也可以根据供求 自 D．果糖)，是一种结晶状的还原性双糖(结构如图1 由调整。因此转基因植物生产异麦芽酮糖有望成 所示)，俗称帕拉金糖。它的味道和外观都和蔗糖 为一种更经济的方法。 很相似，但甜味强度只有蔗糖的一半。总体而言， 异麦芽酮糖的物理化学性质，特别是其很低的致龋 一 、 用转基因烟草植物生产 齿特性，决定了它在大多数的甜味食品中可以充当 1 克隆和表达 一 种理想的蔗糖替代品。 从 Erwiniarhapontic中克隆出一种蔗糖异构酶 基因(palI)，这种酶对蔗糖具有严格的底物特异 性，催化 Km(米氏常数)为200raM，且反应不可逆。 然后在大肠杆菌中通过不同表达验证它的功能。 H 由于palI基因的编码区缺乏信号肽，通过 PCR的 方法放大，并将之插入到介质pBinAR中，这个介质 是位于羧乙基精氨酸合成酶的启动基因 CaMV 图1 异麦芽酮糖的化学结构式 35S和终止子之间的(图2)。然后将蛋白酶抑制剂 Ⅱ的抑制剂的信号肽插入到编码区的前面，以把蔗 现阶段 ，工业化生产异麦芽酮糖是用固定化微 糖异构酶引入原地胞质区域。 生物从蔗糖转化得到。但 由于这种 以反应器为基 础的生产方法比较昂贵，而且转化比例有限。这限 筛选出改造基因后的烟草植物中若干株新长 制了这种可替代蔗糖的甜味剂的大规模使用。现 出的芽，经扫描和分析，约 90％都表现出正信号 在已有研究者尝试将 Erwiniarhaponti中蔗糖异构 (即有 palI基因表达)。选出几株表达水平差不 酶基因(palI)在植物中表达，从而将植物中的蔗 多的进行进一步分析。最后，选定的植物在组织培 糖转化为异麦芽酮糖。因为蔗糖在许多植物器官 养基中繁殖，并将后代转移到温室中。接下来研究 14 维普资讯