用β—CD构筑琥珀酸脱氢酶的研究.pdfVIP

维普资讯 ① {)《。 有机化学 YOUJIHUAXUE，1998，18，66~70 研究简报 仅多￡}o c1 JJ 用 lI．cD构筑琥珀酸脱氢酶的研究 任维衡* 丁志刚 宋发军 洪盛志 刘康朝 — 一 一 (雨前再孽院化学系 武汉43o074) 摘要 用 —CD，马来酸酐，氯乙酸和三氯化铁反应，合成了双七6-氧七 羧甲基一丁二酸 ·1．4-8i14-)-于 cD Fe3配合物(简称模拟酶)。以此模拟酶模拟琥珀酸脱氢酶，将琥珀酸氧化脱氢生成延胡索酸 ，同时，又将甲苯氧 琥珀酸 脱墨堕 苎 -化 生物酶既具有催化速率的高效性，又具有对底物构型的选择性，但 由于对环境条件变化过于敏 感，易使其催化效率降低直至失活，使得对它们的利用受到局限。针对这种情况 ，化学家们模仿生 物酶的结构特征，开展了既具有较高催化效率和立体选择性，又对外界环境的变化不太敏感的人工 合成模拟酶的研究。 模拟酶的研究虽然难度比较太，但现今研究得非常活跃。而选作模拟酶的诸多材料中，以结构 上存在一个手性疏水空腔的环糊精，特别是B．环糊精(8．cyclc~lextrin简写8．CD)研究得 比较多。在 研究过程中，人们还注意到用化学法修饰 cD葡萄糖基上 ，q 和 的羟基时，既不损害 CD 用于包结客体的疏水性中心空洞，又可以合成一系列具有多部位识别功能的模拟酶 lJ。本文所 报导的是利用我们新合成的模拟酶，即双f6．氧七 羧甲基．丁二酸．1．4-单醋—4手 } CD·Fel3配 合物，模拟琥珀酸脱氢酶，催化琥珀酸氧化脱氢生成延胡索酸的反应，以及模拟过氧化物酶将甲苯 氧化成苯 甲酸的反应。其反应式如下： 。 一c。f。一 一cn cnc。。n] 一2CICHzCOOH帅 _Lf)。OCH2COOH1。_f)一l一H2COO-1．Fe3+ 9 CH2COOH 一2 L 2 CHzCO0 J H00C— CHz— CH2一 COOH十 H202三一 lHc。。 +2H~O 2 H OOC— CH CH CHO COOH 八 +。 s 2 — 1996-0923收稿 ，1997O6-2D修回。 湖北省科委基金资助项 目。 维普资讯 第 1期 任维衡等：用 ∞ 掏筑琥珀酸脱氢酶的研究 67 1 实验 1．1 仪器 岛津 IR-440红外光谱仪，Uv一240紫外一可见分光光度计，AA-646原子吸收光谱仪，AF，24o元 素分析仪，ARX-500核磁共振仪。 1．2 试剂 B．CD苏州味精厂工业品经两次重结晶，马来酸酐，琥珀酸，甲苯和三氯化铁均为分析纯，其他 试剂为化学纯。 1．3 模拟酶的合成 1．3．1 化合物 1的合成 称取 225克(0．23mo1)马来酸酐和 17克(0．0015mo1)~-CD，将两者在研钵中边研碎边进行充 分混匀，并及时转移到干净带盖锥形瓶中，锥形瓶置于80℃的恒温水浴锅中反应，每隔5分钟搅拌 一 次，反应体系逐渐变成较粘稠的液体，反应 4小时后体系变成白色固体，继续保温至8小时停止， 冷却到室温后加人无水乙醇充分捣碎、搅拌、过滤。固体先后用无水乙醇和80％乙醇各洗涤两次 (300mL／~)，抽干，收集 ，将固体置于干燥器中干燥保存，得白色粉末 18克 (0．01