他莫昔芬在大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的神经保护作用及其机制的研究.pdfVIP

中文摘要 他莫昔芬在大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的神经保护作用及机制研究 II 他莫昔芬在大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的神经保护作用及机制研究 中文摘要 他莫昔芬在大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的神经 保护作用及机制研究 中文摘要 第一部分 他莫昔芬在大鼠蛛网膜下腔出血后 早期脑损伤中的神经保护作用 目的：应用蛛网膜下腔出血 （SAH）后早期脑损伤 （EBI ）模型，探讨他莫昔芬 （Tamoxifen TMX ）对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤是否具有神经保护作用。 方法：48 只健康成年雄性SD 大鼠随机分为对照组（n=12 ），SAH 组（n=12 ）， 安慰剂组（n=12 ）和他莫昔芬治疗组（n= 12）。应用视交叉前池一次注血法制成SAH 后EBI 模型，在蛛网膜下腔出血后2h、24h 及36h 分别腹腔注射他莫昔芬，48 小时 后处死大鼠，取颞底皮层脑组织做标本，测定脑水肿变化及血脑屏障变化，探讨他莫 昔芬对大鼠SAH 后EBI 是否具有神经保护作用。 结果：与对照组相比，SAH 组大鼠脑组织含水量明显增加，48h 时水肿百分数达 到82.51%，血脑屏障破坏明显，48h 时测定皮层脑组织伊文氏蓝 （EB ）含量达到21.5 ng/mg ；与 SAH 组相比，他莫昔芬治疗后大鼠脑水肿指数降低，48h 时水肿百分数 80.55%，血脑屏障功能改善，48h 时测定皮层脑组织EB 含量13.2 ng/mg ；安慰剂组 与SAH 组相比改善不明显。 结论：1．通过构建大鼠SAH 模型，能够观察到大鼠SAH 后48h 脑组织含水量 增加明显，血脑屏障破坏明显，说明SAH 后存在EBI 。2 ．应用他莫昔芬治疗后，能 有效降低SAH 后脑水肿、改善血脑屏障，提示他莫昔芬对大鼠SAH 后EBI 具有神 经保护作用。 关键词：蛛网膜下腔出血；早期脑损伤；他莫昔芬 I 中文摘要 他莫昔芬在大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的神经保护作用及机制研究 第二部分 他莫昔芬对大鼠蛛网膜下腔出血后大脑皮层炎症信号通路的 干预研究 目的：研究SAH 后大脑皮层TLR4 （Toll 样受体4 ）/NF- κ B （核因子κB ）信号 通路及其下游炎症因子及细胞活素的表达变化及他莫昔芬对TLR4/NF- κ B 信号通路 的干预作用，探讨他莫昔芬对SAH 后EBI 神经保护作用机制。 方法：60 只健康成年雄性 SD 大鼠随机分为：对照组 (n=15), SAH 组 (n=15), SAH+安慰剂组 (n=15) 和 SAH+他莫昔芬治疗组 (n=15) 。采用立体定向注射技术， 构建视交叉前池一次注血SAH 模型，对照组开骨窗但不注入动脉血，他莫昔芬治疗 组给予他莫昔芬腹腔注射治疗，每次注射剂量5mg/kg ，在SAH 后2h、24h、36h 分 别腹腔注射。安慰剂组注射等容量溶剂，溶剂为1%乙醇。48 小时后处死大鼠，取颞 底皮层脑组织做标本，采用Western blot 法测定TLR4、NF- κB 及ICAM-1 表达情况； 免疫组化法检测TLR4、NF- κB 及ICAM-1 表达，EMSA 测定NF- κB 的DNA 活性。 通过ELISA 方法分析大鼠脑皮层中细胞活素因子IL-1 β, TNF- α和 IL-6 表达情况比 较。 结果：Western blot结果显示对照组TLR4、NF- κB及ICAM-1蛋白水平较弱；与 对照组相比，SAH组TLR4、NF- κB及ICAM- 1蛋白水平明显增高(P 0.01) ；SAH组与 安慰剂组对比无明显差异