培养基及培养条件对普鲁兰酶的影响.pdfVIP

维普资讯 ) 一 q 第 18卷第 2期 无 锡 轻 工 大 学 学 报 Vo1．18．No．2 1g99年 6月 JournalofW uxiUniversityofLightIndustry 』un．．1999 文章编号：1001—7453(1999)08—0033—06 培养基及培养条件 兰酶的影响 J 金 疆屯 国贤 ，陆 健 一 一 一 (无锡轻工大学生物工程学院．江苏无锡 214036) 摘要：从土壤中分离 出一株产普鲁兰酶的菌株 ，初步鉴定为芽孢杆菌．通过优化发酵培养基 及发酵培养条件 ，在 850mL的摇瓶中可达到 4．5vmol／(min·mL)的昔鲁兰酶酶活．优化后 的发酵培养基成分如下：玉米支链淀粉 2g／dL，蛋白胨 2g／dL．牛肉膏 I．5g／dL．NaCl0．5 g／dL，MnSO·2~mol／L．摇瓶发酵工艺条件 ：接种量 17 ．温度 37℃，摇瓶转速 220r／rain， pH 6-O，发酵周期 82h．通过 2I窖积的发酵罐批式发酵 ．酶活可稳定在 3．3~mol／(min · mL)左右 ． 关 键 词 ：普鲁兰酶 ：芽孢杆菌f优化；发酵 培香钎 中圉分类号百蠡i 、、j司 ii —— 普鲁兰酶 (Pullulanase，EC．3．2．1．41)作为淀粉酶类的新品种，主要应用于以淀粉质为 原料的食品工业 (大部分淀粉质原料含有 75 ～85 的支链淀粉)，通过高效切割 a一1，6一糖 苷键，可 以显著提高淀粉原料的利用率，从而提高生产效率 ，目前已较成功的应用于高葡萄 糖浆、高麦芽糖浆、低聚寡糖和啤酒生产0]，在医药领域亦有应用．有关该酶的报道在国内井 不多见，笔者在 已获菌株的基础上，对培养基成分及培养条件对发酵产酶的影响进行了探 索，在 2L容积罐上批式发酵井与摇瓶发酵作对 比． 1 材料与方法 l-1 菌种 J-008 作者 自筛． 1_2 培养基 l_2-1 试管斜面培养基 支链淀粉 2g／dL，蛋 白胨 0．4g／dL，琼脂 2g／dL，CaCI ·2H O 5O#mol／L，K2HPO ‘·3H2O 0．2g／dL，MnC120．1~．mol／L；pH 6．0，0．1MPa下灭 菌 20 m ln ． 1-2．2 种子培养基 蛋 白胨 1g／dL，牛肉膏 0．5g／dL，NaC10．5g／dL；pH 7．0．0．1MPa 灭菌 20rain． 收稿 日期 1998一O9—21f幡订 日期 ：1998—03—01 作者简介 ：金 羽中(1973年 10月生)，男 ．安徽合肥』、．工学硕士 33 维普资讯 12．3 起始发酵培养基 支链淀粉 2g／dL。鱼粉蛋自胨 0．8g／dL，牛肉膏 0．5g／dL，NaC1 0．5g／dL；pH6．5和 0．1MP