轴突导向因子netrin-1对早期糖尿病大鼠血视网膜屏障的影响.pdfVIP

472 JOculFundus 生堡堕壅疸叁壹j!堕年9旦第31卷第5期Chin Dis，September2015，V01．31，No．5 ·论著· 轴突导向因子netrin一1对早期糖尿病大鼠 血视网膜屏障的影响 周贤慧 孟旭霞 孙运波 胡迭 郭庆教 【摘要】 目的 观察探讨外源性轴突导向因子netrin一1对早期糖尿病(DM)大鼠血视网膜屏障(BRB) 的影响及可能的作用机制。方法健康雄性Sprague—Dawley大鼠80只，采用随机数字表法将其分为正常 对照组、DM+平衡盐溶液(BSS)组、DM+netrin一1低剂量组、DM+netrin-1高剂量组，每组均为20只大鼠。 链脲佐菌素腹腔注射诱导DM模型。DM3个月时，DM十netrin-I低剂量组、DM+netrin一1高剂量组大鼠 玻璃体腔分别注射10、i00 5 mg／ml的netrin-1tA；DM+BSS组大鼠玻璃体腔注射等体积BSS。高糖高脂 饲养1个月后处死所有大鼠，摘除眼球。每组随机选取5只大鼠行苏木精一伊红染色观察各组大鼠视网膜 微血管改变；免疫组织化学染色检测视网膜闭合蛋白(oecludin)的表达以及荧光定量聚合酶链反应 (RT-PCR)观察occludin mRNA的表达；伊凡思蓝(EB)渗漏试验观察大鼠视网膜微血管结构改变和渗漏。 独立样本t检验对两组间指标进行统计学分析。多组间比较采用单因素方差分析。结果 光学显微镜观 察发现，DM+BSS组大鼠视网膜神经节细胞层水肿，排列紊乱，视网膜微血管扩张，结构异常；DM+netrin-1 高剂量组大鼠视网膜神经节细胞水肿减轻，微血管扩张程度减轻。免疫组织化学染色结果显示，DM+ netrin-[低剂量组、DM十netrin—l高剂量组大鼠视网膜棕黄色颗粒染色范围扩大，颜色加深。RT-PCR检 测结果显示，与正常对照组大鼠视网膜中occludinmRNA表达比较，其余各组大鼠视网膜中oecludin 剂量组间大鼠视网膜平均积分吸光度[A，旧称光密度(OD)]值(IA值)比较，差异有统计学意义(F一 DM+BSS组大鼠视网膜m值与DM+netrin-1低剂量组比较，差异有统计学意义(f=～13．98，P=0．00)； DM+netrin-1高剂量组大鼠视网膜M值与正常对照组比较，差异有统计学意义(t=12．87，P=0．00)。 EB渗漏试验结果显示，DM+BSS组、DM+netrin一1低剂量、DM+netrin一1高剂量组间大鼠视网膜EB渗漏 量比较，差异有统计意义(F一179．69，P=0．00)；DM+netrin-1低剂量组大鼠视网膜EB渗漏量与DM+ netrin—l高剂量组比较，差异有统计学意义(t一12．73，P=0．00)。结论玻璃体腔注射外源性netrin一1对 早期DM大鼠BRB有保护作用；这种保护作用可能是通过抑制视网膜occludin的减少实现。 【关键词】糖尿病视网膜病变／病理生理学； 血视网膜屏障／病理生理学； 神经生长因子类； 动物 实验 中国分类号：R744．1 Theeffectofnetrin-1Oiltheretinalvascular in diabetic ra{sZhouXianhui， permeabilityearly retinopathy Xuxia，SunYunbo，et Qingdao Meng a1．DepartmentofOphthalmology，neAffiliatedHospitalof 266500，China University，Qingdao Correspondingauthor：MengXuxia，EmaiZ：mengxuxia@j63．corn To the andmechanismofnetrin～1onblood—retinalbarrier effect