鲍姆木层孔菌菌丝体活性化合物对胰岛素抵抗HepG2细胞内糖代谢关键酶活性的影响.pdfVIP

食用菌学报@2015．22(2)：35～39 = DOI：10．16488／j．cnki．1005—9873．2015．02．007 鲍姆木层孑L菌菌丝体活性化合物对胰岛素 抵抗HepG2细胞内糖代谢关键酶活性的影响 张超h2，汪雯翰1，杨焱¨，颜梦秋1，冯娜1，张劲松1 (1上海市农业科学院食用菌研究所，农业部南方食用菌资源利用重点实验室，国家食用菌工程技术研究中心， 国家食用菌加工技术研发中心，上海市农业遗传育种重点开放实验室，上海201403； 2上海海洋大学食品学院，上海200234) 醛、柚皮素和黄芩素)对胰岛素抵抗HepG2细胞内糖代谢关键酶己糖激酶、丙酮酸激酶和”葡萄糖苷酶活性 的影响。结果表明：与胰岛索抵抗模组相比，lO、100 pg／mL原儿茶醛和黄芩素显著提升胰岛素抵抗HepG2 升丙酮酸激酶酶活，100 pg／mL原儿茶醛显著抑制”葡萄糖苷酶酶活。 关键词：鲍姆木层孔菌；HepG2细胞；胰岛素抵抗；已糖激酶；丙酮酸激酶；a．葡萄糖苷酶 kinase，PK)[93和多糖 鲍姆木层孔菌(砌P，，i甩淞施“mff)，俗称桑酶丙酮酸激酶(pyruvate 黄，是一类寄生在桑树、杨树等树身腐朽部位的 分解关键酶a．葡萄糖苷酶n叩的酶活影响，探讨鲍 珍稀药用真菌，具有多种药效学活性[1缶]。已有 姆木层孔菌化合物的降糖机理。 研究表明，鲍姆木层孔菌具有良好的降血糖活 1材料与方法 性[1]，上海市农业科学院食用菌研究所加工技术 与发酵研究室前期研究发现，鲍姆木层孑L菌菌丝 1．1样品与试剂 体活性提取物化合物儿茶醛、柚皮素和黄芩素能 活性样品：原儿茶醛、柚皮素和黄芩素为上 海农科院食用菌所加工技术与发酵研究室前期 促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗，降低 培养基中葡萄糖含量，但其降糖作用机制尚不清 从鲍姆木层孔菌(P．沈“mii)菌丝体中分离纯化 楚(尚未发表)。 获得的化合物[1]。 胰岛素抵抗是II型糖尿病的重要发病特征 HepG2细胞(人类肝癌细胞株)：购买于中国 之一。胰岛素抵抗指的是人胰岛素对葡萄糖摄 科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。 取和利用能力下降，从而引起机体代偿性的过量 分泌胰岛素，以维持血糖稳定，而最终导致高胰 培养基、胎牛血清(FBS)和胰酶(含0．25％ED队) 购自美国GIBCo公司；精蛋白生物合成人胰岛素 岛素血症。HepG2细胞是一类分化好的人肝胚 细胞瘤细胞株，生化特性和生物合成能力与人正 注射液为诺和诺德(中国)医用注射产品；人己糖 常的肝细胞极为相似，胰岛素抵抗HepG2细胞激酶(HK)酶联免疫分析试剂盒、人丙酮酸激酶 能够较为准确的模拟II型糖尿病患者体内的生 (PK)酶联免疫分析试剂盒和人a．葡萄糖苷酶酶 化状态‘引。 联免疫分析试剂盒购买自上海朝瑞生物科技有 笔者拟通过观察鲍姆木层孔菌活性物质原 限公司；Tritonx．100、苯甲基磺酰氟(PMSF)和 儿茶醛、柚皮素和黄芩素对胰岛素抵抗HepG2二甲双胍购自美国Sigma公司；Trizol购自大连 模型细胞内糖代谢过程密切相关的糖酵解关键 Takara生物工程公司；其余试剂均为国产分 酶己糖激酶(hexokinase，HK)[8|、糖异生关键析