西方蜜蜂细胞色素P450单加氧酶特性初步与研究.pdfVIP

摘要 细胞色素P450酶系是多功能氧化酶(MFO)的核心酶系，在昆虫中的作用涉及生长、发育、 取食等过程，其对异生物质的代谢特性造成了昆虫对杀虫剂的抗药性和对植物次生物质的耐受性， 它还参与了昆虫体内保幼激素、蜕皮激素和脂肪酸等内源化合物的合成与代谢，是昆虫体内一种 重要的解毒酶系。国外对蜜蜂的研究表明，多功能氧化酶在蜜蜂体内存在，也参与新陈代谢和对 有毒物质的降解，但这些研究主要集中在上世纪八十年代。近年来蜜蜂中毒事件时有发生，因此 有必要对蜜蜂体内重要的解毒酶系一细胞色素P450酶系进行研究，以便为蜜蜂保护提供指导。 本论文对意大利蜜蜂细胞色素P450酶系的测定方法、组织分布、虫态及月份变化规律、蜂 种间差异以及药剂诱导等进行基础性研究，同时运用RACE方法对意大利蜜蜂细胞色素P450基 因家族进行研究。以7．乙氧基香豆素为底物，利用荧光分光光度法检测产物7一羟基香豆素 的荧光变化确定细胞色素P450的O．脱乙基活性，利用正交法找到了反应条件最佳组合：反 应时间20min、温度40℃、pH7．8，建立了适合蜜蜂的最佳反应体系；明确了意大利蜜蜂 细胞色素P450酶系O．脱乙基活性在头、胸、中肠之间的组织分布情况：中肠头部胸部； 意大利蜜蜂细胞色素P450酶系。一脱乙基活性在不同