《人牙髓干细胞体外成骨向分化的实验研究.》.pdfVIP

rl腔颌面修复学杂志2014年7月第 15卷第4期 · 论著 · 人牙髓干细胞体外成骨向分化的实验研究水 毛丽霞 刘加强 赵晶蕾 王 洁 夏韫晖 王 博 袁玲君 房 兵 【摘要】 目的：探讨人牙髓干细胞在体外成骨向分化潜能。方法：用免疫磁珠法分选人牙髓干细胞并检测其干 细胞表面标志物 Stro一1、CD29、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达。体外诱导人牙髓干细胞向成骨细 胞分化，通过碱性磷酸酶染色和茜素红染色观察成骨诱导后细胞的成骨活性和矿化结节形成情况，通过 real—time PCR分析成骨相关基因ALP、colI、RunX2、OC的表达，未成骨诱导细胞作为对照。结果：人牙髓干细胞阳性 表达间充质干细胞表面标志物 Stro-1、CD2 CD44、CD90、CD105，阴性表达造血干细胞表面标志物 CD34、 CD45。成骨诱导 5d、7d、14dALP染色阳性，21d茜素红染色仅诱导组可见明显钙结节形成 ，对照组为阴性。 成骨相关基因ALP、RunX2和 ColImRNA在成骨诱导早期高表达 ，OCmRNA在成骨诱导 14d表达开始逐渐 升高。结论：经磁珠分选纯化的人牙髓干细胞在成骨诱导条件下可向成骨细胞分化 ，形成钙盐沉积和矿化结节， ALP、colI、RunX2、OC参与了成骨向分化的过程。 关键词：人牙髓；干细胞；成骨诱导；细胞分化 [中国图书分类号]R782．4 [文献标识码]A [文章编号]1009—3761(2014)04—0193—06 Studyonosteogenicdifferentiationandgeneexpressionofhumandentalpulpstem cellsinvitro MAOLi—xia，LIUJia—qiang，ZHA0Jing—lei，WANGJie，XIAYun—hui，WANGBo，YUANLing-jun，FANGBing． rDepartmentofOralandCranomaxillofacialScience,NinthPeople’sHospital,Collegeofstomatology,ShanghaiJiong TongUniversitySchoolofMedicine，ShanghaiKeyLaboratoryofStomatology,Shanghai200011，China) [Abstract]0bjective：Toinvestigatethecapabilityofhumandentalpulpstemcells(hDPSCs)onosteogenicdifferentia— tion invitro．M ethods：hDPSCswerepurifiedbymagnetic—activatedcellsortingwithStro一1andthephenotypeswereana— lyzedwithstem cellsurfacemarkersCD29，CD44，CD90，CD105，Stro-1，CD34，CD45．hDPSCsweretreatedcontinuous— lywithosteogenicinductivemediumfor21．Alkalinephosphatase(ALP)staining，theexpressionlevelsofALP，osteocalcin (oc)，CollengenI(ColI)，RunX2genesandalizarinredstainingofrmineralizationatdifferenttimepointswereanalyzed． Thenon-inducedcellswereusedascontro1．Results：PhenotypeanalysisindicatedthathDPSCswerepositiveformes— cnchymestem cellmarkersCD29，CD44，CD90，CD105，Stro-1，andnegativeofrhematopoieticstem ce