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中文摘要 Visfatin对内皮祖细胞凋亡的影响及其机制探讨 摘 要 内皮祖细胞(endothelial 997 progenitor 年首次描述的一种来源于骨髓存在于外周血并且能够定向分化为内皮细 胞的前体细胞。EPCs具有增殖和修复能力，在机体血管组织损伤后， EPCs通过动员、迁移、归巢以及形成毛细血管网一系列过程，促进血管 损伤部位内皮再生和修复。EPCs尚能分泌生长因子激活血管局部的成熟 内皮细胞，进一步参与血管修复过程。目前随着人们生活方式的改变， 糖尿病的发病率逐年上升，心血管并发症是糖尿病患者的主要死因。研 究表明糖尿病患者EPCs数量减少、功能损伤与心血管并发症的发生和发 展密切相关，EPCs数量减少和功能下降被认为是心血管疾病的标志。 EPCs受多种因素的影响，肥胖、高血压、高血糖、脂代谢紊乱等患者均 存在EPCs数量减少及功能受损。 谢综合征患者体内，尤其是有动脉粥样硬化病变的患者体内表达增强。在 代谢相关疾病中visfatin水平变化导致炎症反应和血管内皮功能受损，其 可能是动脉粥样硬化过程中影响炎症反应的关键环节。 的具体机制。 亡的具体机制。 方法：采用密度梯度离心法分离健康分娩妇女脐带血中的单个核细 (20％胎牛血清，l％青霉素链霉素双抗，0．04％氢化可的松，0．1％肝 连接蛋白)重悬，在37。C、5％C02、湿度95％恒温培养箱培养。每天在 万方数据 中文摘要 倒置显微镜下观察细胞形态。培养第7天，采用流式细胞仪检测EPCs表 factor 核因子．1(B(nuclear kappa visfatin孵育EPCs48小时。收集 孵育EPCsl小时后，分别加入150ng／ml 细胞，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率，Real—TimePCR检测EPCs中天 3)、 冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinylspecificproteinase3，caspase aspartate Bax、Bcl一2、NF—rd3的mRNA表达水平，Westem adhesionmolecule1，ICAMl)蛋白表达水平。 附分子1(intercellular 结果： 1EPCs的分离培养与鉴定 分离单个核细胞在培养48小时后大部分细胞贴壁，呈鹅卵石样。以 后细胞逐渐伸展，形态改变，呈纺锤状。10天以后部分细胞聚集成集落 显微镜下可见EPCs可以摄取1，1’．二(十八烷基)一3，3’，3’，3’一四甲基吲哚羰 Low Density 基花青高氯酸(DiI)乙酰化低密度脂蛋白(Acetylated 集素一1(Ulex europaeus 绿色，双染细胞呈橘黄色。 2Visfatin对EPCs凋亡的影响： 与0 依赖诱导EPCs凋亡，150ng／ml 3、Bax visfatin组有统计学差异 mRNA与蛋白表达升高，150ng／ml (P0．05)，Bcl一2mRNA与蛋白表达下降，各组间差异无统计学意义(P 0．05)；1 visfatin组Bax／Bcl．2mRNA与蛋白比值均升高，差异有 50ng／ml 统计学意义(P0．05)。与1