二氢青蒿素对人宫颈癌Hela和Siha细胞辐射敏感性的影响及其作用机制的研究.pdfVIP

二氢青蓠素对人宫颈癌Hela和Siha细胞辐射敏感性的影响及作用机制研究 中文摘要 二氢青蒿素对人宫颈癌HeLa和Siha细胞辐射敏感性的 影响及作用机制研究 中文摘要 颈癌HeLa细胞及p53野生型人宫颈癌Siha细胞辐射增敏作用及机制。通过检测二氢 青蒿素的浓度和作用时间对HeLa和Siha细胞的抑制效应，确定用作辐射增敏实验的 药物浓度及时间：通过研究二氢青蒿素对辐射后HeLa和Siha细胞增殖能力的影响， 探讨二氢青蒿素对细胞辐射敏感性的影响；通过对二氢青蒿素及X．射线作用后细胞 素辐射增敏机制进行研究。并且，比较分析二氢青蒿素对具有不同p53功能的人宫颈 癌细胞辐射增敏作用及作用机理的差异性。 方法 (1)利用四氮唑盐比色试验(MTT)检测二氢青蒿素对人宫颈癌HeLa 和Siha细胞存活分数的影响；(2)应用克隆形成法及细胞凋亡率检N--氢青蒿素对 细胞辐射敏感性的影响；(3)利用流式细胞术检N--氢青蒿素及X．射线作用后对细 胞周期的影响；(4)应用WesternBlot法观察二氢青蒿素及X．射线作用后对细胞周期 调控相关蛋白weel，eyclinBl，ode2的影响。 结果(1)二氢青蒿素对人宫颈癌细胞的抑制率具有浓度及时间依赖性，其抑 制作用随二氢青蒿素浓度和作用时间的增加而增加；(2)二氢青蒿素对p53功能不同 的人宫颈癌细胞的抑制率不同，当人宫颈癌HeLa和Siha细胞的抑制率均达到16％ 浓度下，细胞克隆形成率随照射剂量增加而减少；二氢青蒿素对p53突变型人宫颈癌 HeLa细胞具有明显的辐射增敏作用，对p53野生型人宫颈癌Siha细胞没有明显辐射 增敏作用。对于HeLa细胞，单纯照射组和药物+照射组平均致死剂量(Do)分别为 (4) 流式细胞术检测细胞凋亡结果显示，与单纯照射组的16．26％凋亡率相比，HeLa细胞 二氢青蒿素对人宫颈癌Hcla和Siha细胞辐射敏感性的影响及作用机制研究 中文摘要 纯照射组和药物+照射组的凋亡率分别为26．38％和27．55％，差异无统计学意义 (PO．05)； (5)流式细胞术检测细胞周期发现，对于HeLa细胞，药物+照射组与 化(P0．05)； 结‘论 (1)二氢青蒿素对人宫颈癌HeLa和Siha细胞的抑制率随着二氢青蒿素 浓度的增加及作用时间的延长而增加；(2)相同浓度的二氢青蒿素对人宫颈癌HeLa 能明显增加p53突变型宫颈癌细胞HeLa的辐射敏感性，而对于p53野生型宫颈癌细 胞Siha没有明显的辐射增敏作用；(4)二氢青蒿素能增加受照后的人宫颈癌HeLa 细胞的凋亡率；而对于人宫颈癌Siha细胞，二氢青蒿素联合照射组与单纯照射组相 比凋亡率无明显变化； (5)二氢青蒿素对HeLa细胞的辐射增敏作用与其抑制辐射 诱导活化的G2／M期阻滞效应，使受损细胞没有经过修复直接进入分裂期而发生死亡 有关；二氢青蒿素对Siha细胞无辐射增敏作用与辐射主要诱导Siha细胞产生Gl／S期 阻滞，而对G2／M期没有明显阻滞效应有关；(6)HeLa细胞经二氢青蒿素联合照射 的G2／M期阻滞效应，发挥辐射增敏作用；Siha细胞经辐射诱导主要发生Gl／S期阻 达均没有明显的变化，表明二氢青蒿素可能通过weel间接作用于cdc2，而不是直接 引起cdc2蛋白含量的变化。 关键词二氢青蒿素；辐射增敏作用；HcLa细胞；Siha细胞；细胞周期；weel； eyclinBl；cdc2 作 者：陈遐林 指导教师：曹建平 n AbsWam The ontheeffectandmechanismof study