血型Ii单克隆抗体的研制及其羊抗鼠二抗的制备.pdfVIP

中文摘要 血型／?单克隆抗体的研制 及羊抗鼠二抗的制备 研究生：洪光 导师：李厚达教授 矗血型系统是第27个红细胞血型系统。它们没有自己的编码基 因，i、I抗原分别由线性和分支型多聚N一乙酰半乳糖胺决定，因此 其抗原决定簇为糖分子。新生儿脐血红细胞携带i抗原，随着生长发育， D一1,6一N一乙酰半乳糖胺转移酶活性的出现将2个N．乙酰基乳糖胺 (N-AC)分别加到i抗原的线性多聚N一乙酰半乳糖胺结构的3和6 位，从而使直链i抗原转变为分支型I抗原。 本研究选用脐血红细胞做免疫原，用i(+)和i(一)红细胞进行筛 选，得到三株抗i单克隆抗体。通过纯化i单克隆抗体(IgG)作为免 疫原，获得了抗i的羊抗鼠二抗。抗i单克隆抗体及其二抗的研制为 检测稀有血型ii，提供了必备的检测试剂。 通过RT-PCR的方法成功地从胎盘组织中克隆了B一1，6．N一乙酰 半乳糖胺转移酶基因(IgnTc)，并构建了重组真核表达载体 的成功表达。IgnTc活性的出现将CHO细胞表面的i抗原转变为，抗 原，获得了I阳性的CHO细胞株，为筛选抗I单克隆抗体及临床鉴定 血清中相关I抗体的提供了重要的工具。 本研究的实旅将进一步确保输血安全，给输血患者带来福音，还 将为在中国开展稀有血型的检测、普查工作，建立稀有血型库奠定基 础。 关键词：Ii抗原；IGnTc；单克隆抗体；二抗 TheManufactureof Abandthe of Anti—anti—f Preparations IgG MD candidate：HongGuang Houda Supervisor：Li AB STRACT Ii the is 27thredbloodcell blood—groupsystem blood—groupsystem． as donothaveowncode andarecharacterizedlinearand They gene branched theandI i are repeats antigens structurescharacterized．Thenewbornnavelbloodredcellcarries carbohydrate i oftheitotheI structure the of antigen．Conversion requiresactivity transferase(IGnn．Theenzyme I-branchingl3—1,6一N—acetylglucosaminyl adds2 the structu