有机小分子探针研究.pdf

摘要 摘要 本文提出2．(8一羟基喹啉一5．磺酸一7一偶氮)-l，8一二羟基一3，6．萘二磺酸、马兜铃酸 A和甘草酸单铵盐作为蛋白质探针，葛根素作为核酸探针。研究结果表明： 1．运用平衡透析法和分光光度法研究了2．(8一羟基喹啉．5一磺酸一7·偶氮)一1，8一 结合反应，认为8QSSAC与BSA之间的结合力是以静电引力为主的非共价作用 ， 力，并探讨了其结合模型。(在298K下，测得这一反应的最大结合数为33～40， 结合常数为6．1×105L／mol。还研究了溶液基本条件如酸度和离子强度等对 8Q5SAC与牛血清白蛋白分子复合物形成的影响，在pH=3．34条件下，标准工作 、／ 曲线的线性范围为0．20～46．90 mg／L。p 2．应用光谱法和电化学方法研究了水溶液中马兜铃酸A与牛血清白蛋白分 子间的结合反应，铡定了反应的形成常数KA及热力学函数△G，△H和△s，并 确定了分子问作用力性质；还讨论了温度和微量金属离子对药物与牛血清白蛋白 形成常数的影响：采用同步荧光技术考察了马兜铃酸A对牛血清白蛋白构象的 影响；依据Forster非辐射能量转移机制，确定了给体一受体间的结合距离和能 、 ／ 量转移效率。¨ } 3．研究了甘草酸单铵盐(MAG)对牛血清白蛋白(BSA)的荧光猝灭机理。 ，、 (证实了二者问的相互作用是由于生成了超分子复合物的静态猝灭过程，求出了反 应的形成常数KA及热力学函数A G，△H和△S，根据热力学函数确定了超分子 问作用力类型为静电引力；还讨论了温度和微量金属离子对形成常数的影响；依 据Forster非辐射能量转移机制，确定了给体一受体间的结合距离和能量转移效 率；采用同步荧光技术考察了甘草酸单铵盐对牛血清白蛋白构象的影响≯√ 4．基于葛根素中加入DNA或RNA后，葛根素的荧光被猝灭，建立了葛根 r m-n 素测定DNA或RNA的新方法。离根素的最大激发波长和发射波长分别为266 L 和460 nm。在最佳的实验条件下，鱼精子脱氧核糖核酸(FSDNA)的线性范围 DNA)为2．旷36．0 核糖核酸(YRNA)为1．1—36．0．g／mU，变性脱氧核糖核酸(Da ¨g／mL。FSDNA的最低检测限为2．9肛g／mL，CTDNA为3．6．g／mL，YRNA为 DNA 1．1肛g／mL，Da g／mL的FS DNA为2．9“g／mL。五次平行测定浓度为20u 摘要 的相对标准偏差为1．5％o葛根素与DNA的作用机理也进行了探讨≯／ 关键词：蛋白质，核酸，探针，2-(8一羟基喹啉一5一磺酸．7一偶氮)一1，8一二羟基一3，6一萘 二磺酸，马兜铃酸A，甘草酸单铵盐，葛根素，恼合反应≯荧光猝灭 Ⅱ 摘要 Abstract 2一(8一hydroxyl di— sulfoacid，aristolochicA，monoammoniumwere as of glycy