五味子乙素预防BaP致HTR8SV neo细胞凋亡损伤研究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 英文缩写……………………………………………………………………7 前言……………………………………………………………………8一日U百…………………………………………………………………… 材料与方法……………………………………………………………8 结果……………………………………………………………………20 附图……………………………………………………………………23 附表……………………………………………………………………31 讨论……………………………………………………………………32 结论……………………………………………………………………37 参考文献………………………………………………………………38 综述五味子乙素的药理作用……………………………………………．43 致谢…………………………………………………………………………50 个人简历……………………………………………………………………51 万方数据 中文摘要 摘 要 多环芳烃是常见的空气污染物，苯并(a)芘(BaP)是多环芳烃中最有 代表性的污染物，主要来自于煤炭燃烧、烟草烟雾、烹调油烟和汽车尾气， 容易在土壤、水体和作物中残留蓄积【1】。有研究发现，苯并(a)芘与不 良妊娠结局的发生有关，如流产、低出生体重及畸形等，还和生育能力下 降、不孕不育有关i2弓]，其可能的作用机制包括参与氧化损伤、DNA损伤、 细胞凋亡、细胞色素P450酶的代谢及抗雌激素效应等【每11】。 五味子(北五味子)属于木兰科植物，具有滋肾、止泻、敛肺、宁心、 涩精、安神等功效，其主要成分五味子乙素不仅具有抗氧化和抗凋亡功能 子乙素在空气污染物致胚胎损伤的预防作用方面的研究尚未见报道。本实 讨五味子乙素预防BaP致HTR8．SVneo细胞凋亡损伤的作用。 目的：研究五味子乙素通过抗调亡途径预防苯并(a)芘(bap)对人 绒毛膜外滋养层细胞的损伤作用，为将其开发为环境污染物生殖毒性的 保护剂提供理论依据和实验基础。 方法： l构建细胞模型： MTS法分别检测五味子乙素、BaP对人绒毛膜 BaP作用24h均可 外滋养层细胞的生长曲线影响，研究发现1～209mol／L 使细胞生存率下降，且细胞生存率随着BaP作用浓度的加大而下降，根 据细胞生存率和染毒强度，选择细胞抑制率在30％左右、染毒强度 2ptmol／L)+Bap(201amol／L)染毒组。 形态学变化和细胞的凋亡率，JC一1荧光探针法检测细胞的线粒体膜电位 变化。 万方数据 中文摘要 3 ELISA法分别检测细胞内细胞色素C、Bax、Bcl．2的蛋白浓度， 结果： l五味子乙素对BaP损伤的保护作用 gtrnol／LT；味子乙素为 1．187土0．015，0．59mol／L五味子乙素为1．4834-0．022，1 异有统计学意义(P0．05)。 2五昧子乙素对BaP损伤模型中细胞凋亡情况的影响 实验结果发现五昧子乙素可以降低BaP对人绒毛膜外滋养细胞的凋 亡的形态学改变，用流式细胞仪检测每组细胞的凋亡率，发现不同浓度 的五味子乙素预处理24h可降低BaP损伤模型细胞凋亡率，空白对照组凋 0．036士0．014，与BaP染毒组相比，差异有统计学意义(PO．05)。 3五味子乙素对BaP损伤模型中线粒体膜电位变化的影响 结果表明不同浓度的五味子乙素预处理24h后可降低BaP损伤模型 细胞的线粒体膜电位变化，空白对照组红／绿荧光强度为10．204-2．37，BaP