谷胱甘肽转移酶及抑制剂在宫颈癌化疗中的作用.pdf

谷胱甘肽转移酶及其抑制剂在宫颈癌化疗 中的作用 博士研究生：黄神姣 指导老师：余艳红教授 M．James You副教授 摘 要 背景与目的 宫颈癌治疗根据患者的f靥床分期、年龄、一般情况、肿瘤相关因素等决定 治疗方案【261。宫颈癌早期(I～IIA期)主要采用手术治疗，巨块型4cm的宫颈 B~ⅢB 癌IB2及IIA期的患者术前采用新辅助化疗后手术，局部晚期宫颈癌(II 期)目前采用放化疗同步治疗，晚期(iv期)多采用化疗加放疗【94951。近年来，由 ● 于联合化疗的进展，宫颈癌的化疗也从对晚期复发癌的姑息治疗变成宫颈癌综 合治疗的重要组成部分。尤其是新辅助化疗因其能够缩小局部肿瘤体积、清除 或抑制亚临床转移灶、提高后续治疗的效果，受到日益广泛的关注。然而，即 使理想的手术、放疗、化疗等多种方式联合治疗，III、IVA宫颈癌患者5年无 病生存率不到一半。化疗药物耐药是中晚期宫颈癌治疗失败的主要原因。引起 药物耐药的原因是多因素的，包括避免凋亡细胞死亡，改变多种药物耐药相关 蛋白的表达，改变药物代谢或吸收，和／或谷胱甘肽转移酶过表达。 谷胱甘肽转移酶(glutathione 因家族，为重要的II相代谢酶，其主要功能是催化谷胱甘肽和化疗药物、致癌 物、环境污染物等一系列外来物结合，增加代谢产物水溶性，促进其排出，达 到解毒功能。临床应用的许多抗癌药物，如顺铂、阿霉素、卡氮芥、丝裂霉素 等都是GSTs的底物。GSTs基因多态性可导致酶活性降低或丧失，从而增高宿 中文摘要 主对某些毒物和致癌物作用的敏感性，增加细胞毒作用。药理遗传学和基因组 学研究表明，GSTs基因多态性与乳腺癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌的发生和化 疗耐药相关。 Townsend等的研究显示GSTs在肿瘤组织中高表达，导致肿瘤对多种化疗 药物耐药，提示GST在原发及继发性耐药中发挥重要的作用。体外活体实验显 示，化疗影响GSTs mRNA表达水平。Huang等的研究显示骨肉瘤细胞经DXR mRNA的表达上调，上调程 暴露于5一FU或CDDP，引起TS、GST-pi和DPD 度与药物耐药相关【911。目前，对化疗对GSTmRNA表达的影响集中于GSTx，而对 GSTTl、GSTMl mRNA表达的影响尚未见报道GSTs抑制剂已经形成，并用于调节 acid，EA) GSTs高表达的实体肿瘤化疗耐药的调节。其中利尿酸(ethacrynic 是GSTs抑制剂的重要代表药。 至今为止，唯一的GSTs与宫颈癌化疗相关的报道是SohY等的研究。他 们对12例宫颈癌和子宫内膜癌患者化疗前后GSTx表达进行了观察，尽管他们 的研究显示化疗后GSTx表达阳性与预后差相关，但由于样本例数过小而无统 计学意义【65】。因此，GSTs基因多态性及化疗对GSTsmRNA表达的影响和GSTs 及其抑制剂在宫颈癌化疗耐药中的作用尚不明确。本研究通过对宫颈癌细胞进 行培养和GSTs基因分型，检测GSTsmRNA表达，使用化疗药物对细胞进行处 理，观察化疗对GSTsmRNA表达的影响；同时采用化疗药物阿霉素(DⅫ)、 长春新碱(VCR)和GSTs抑制剂EA对宫颈癌细胞进行处理，观察药物对细胞 生长和存活，旨在分析GST基因多态性及化疗对GSTsmRNA表达的影响，和 GSTs及其抑制剂在宫颈癌化疗反应中的作用。 材料和方法 1．宫颈癌细胞培养 Hela、Siha、C一33A为宫颈癌细胞，贴壁生长；Siha、C．33A培养于含