茄未成熟叶与衰老叶叶绿体超微结构比较研究.pdfVIP

第30卷 第6期 电 子 显 微 学 报 VoL30．No．6 2011年 l2月 JournalofChineseElectronMicroscopySociety 2011．12 文章编号：1000—6281(2011)060541—06 茄未成熟叶与衰老叶叶绿体超微结构比较研究 刘 林 (临沂大学生命科学院，山东 I临沂276000) 摘 要 ：为揭示叶衰老对茄叶叶绿体超微结构的影响 。用透射 电子显微技术对茄未成熟叶和衰老 叶叶 肉细胞 叶绿 体进行 比较研究。结果表 明：未成熟叶叶绿体类囊体染色深 ，基粒柱状 ，许多基粒类囊体 向基质 中延伸 ，基粒之间 由基质类囊体连接，基质中有大量淀粉和少量质体小球。小球体积小，直径0．1 m以下；衰老叶叶绿体类囊体染色 较浅，基粒球状。基粒类囊体向基质 中的延伸减少，基质类囊体减少，淀粉减少，质体小球数量增多、体积增大，直径 可达0．9 m，基质中有酚类物质积累。显然，叶衰老引起茄叶肉细胞叶绿体类囊体膜组成改变，基质类囊体解体， 淀粉减少而质体小球增加 ，并引起酚类物质积累。 关键词 ：茄 ；叶衰老；叶绿体 ；超微结构 中图分类号 ：$641．1；Q336 文献标识码 ：A 叶绿体是植物细胞进行光合作用的细胞器，存 选叶片 已经相 当扩展但还没有达到最大面积 的叶 在于叶器官或其它绿色部分 “，与作物产量关系 (本文称其为未成熟叶)，从叶片中部剪取约 1Crtl 密切 。叶肉细胞叶绿体位于细胞中央大液泡与 叶片，并对此 叶进行标记 以便 Et后继续取材 。7月 细胞壁之 间的区域 。叶绿体透镜状 ，分为被膜 、 15Et，该叶叶色灰绿 ，光泽变暗(本文称其衰老叶)， 类囊体、膜间隙、类囊体腔和基质等部分。类囊体 从叶片中部剪取约 1cm 叶片。 是独立于被膜 的扁平膜囊，有序地垛叠形成柱状或 1．2 样品处理 筒状基粒。基粒 中的类囊体称基粒类囊体或基粒 将所取叶片在 2％戊二醛和 5％多聚甲醛混合 片层 ，基质 中的类囊体称基质类囊体或基质片层。 液中(0．05mol／L磷酸缓冲液配制 ，pH7．0)于室温 类囊体的内部空间称类囊体腔。类囊体之外、被膜 下固定4h，期间将其切成 0．5mm ×0．5mm小块。 以内是基质 ，基质中除含有 DNA、RNA、核糖体和碳 再放人 1％锇酸 (0．05mol／L磷酸缓冲液配制 ， 水化合物合成系统 外 ，还有颗粒状贮藏物质 ，如 pH7．0)中于4。C温度下固定4h。然后用梯度 10％ 淀粉粒和质体小球 。 的酒精系列脱水 ，从 20％ ～100％，每级 10min。经 很多因素可以诱导叶绿体发生化学组成、形态 过酒精和丙酮混合液及纯丙酮将样 品中的酒精置 和结构等不同水平的变化 。 ，从而导致叶绿体功 换成丙酮 ，再将样 品浸入丙酮 ：Epon-812树脂为 能发生变化。本研究利用透射 电子显微术 ，以蔬菜 3：1、1：1和 1：3的混合物中各 1h，在纯 Epon一812树 作物茄为材料 ，对未成熟叶和衰老叶的叶绿体超微 脂 中渗透 24h，然后包埋，在 60。c培养箱 中进行聚 结构进行 比较 ，以揭示叶衰老引起 的茄叶肉细胞 叶 合反应。用UltracutR切片机切厚度 1 m半薄切 绿体超微结构变化 ，为茄栽培管理工作提供参考 片和70nm超薄切片。半薄切片装载于载玻片上， 资料。 用 甲苯胺蓝-0染色 ，光镜下观察照相 。超薄切片装