水稻矮缩病毒云南、浙江分离株侵染水稻植株的细胞病理比较研究.pdfVIP

维普资讯 电 子 显 微 学 报 Vo1．25，No．2 第25卷 第 2期 2006年 4月 JournalofChineseElectronMicroscopySociety 20o6．04 文章编号 ：1000-6281(20O6)02-0151-05 水稻矮缩病毒云南、浙江分离株侵染水稻植株的 细胞病理比较研究 张仲凯 ，方 琦 ，魏春红 ，丁 铭 ，董家红 ，俞 立 ，李 毅 (1云南省农业生物技术重点实验室，云南 昆明650223；2北京大学生命科学学院，北京 100871) 摘 要 ：为探讨水稻矮缩病毒(RDV)不同分离株侵染寄主植物的细胞病理学变化 ，验证 RDV部分基 因差异是否引 起致病性差异，本文应用超薄切片电镜技术比较观察 RDV云南分离株和浙江分离株侵染水稻的细胞病理。结果 显示．RDV云南分离株侵染的水稻叶片中充满病毒粒体 的细胞呈条带状分布 ，呈现 出明显的侵染 中心。在充满病 毒粒体的细胞周围，相邻细胞不 同程度地病变 ，叶绿体膜 系统消失，部分叶绿体 中含有病毒颗粒 ，线粒体残体及细 胞质 中有分散或聚集的病毒粒体 ，细胞核 中未见病毒粒体 ；离侵染 中心较远 的细胞 中亚生臣胞结构较完整。RDV浙 江分离株侵染的水稻叶片中部分细胞充满病毒粒体 ，无明显的条带状分布 ，其他细胞病理特征与 RDV云南分离株 侵染的水稻叶片相似。这些结果表 明。RDV不同分离株侵染寄主植株 的细胞病理特征无显著差异，对其致病性的 差异 需进一步研究。 关键词 ：水稻矮缩病毒 ；细胞病理；侵染 中心；致病性 中图分类号 ：$511；$432．4 1；$432．1；Q336 文献标识码 ：A 水稻矮缩病是我国水稻的一种重要病害。该病 水稻植株亚细胞水平上的病变特征。 我兰国云南 1材料与方法 、 福建和浙江等南方稻 区普遍发生。该病 一 。～ 在水稻生长 中后期发生对产量影响较小 ，但在苗期 1．1 材料 发生引起水稻植株严重矮化 ，不能抽穗结实。水稻 分别从云南省昆明市北郊和浙江省杭州市郊区 矮缩病由水稻矮缩病毒 (r／cedwaqevirus，RDV)引起。 采集植株明显矮化、叶色浓绿或叶部有褪绿斑点的 RDV属于呼肠孤病毒科 (Reoviridae)、植物呼肠孤病 水稻矮缩病株，温室盆栽 。应用负染色制样 电子显 毒属 (Phfl,oreovirus)，最早 由Takta(1895～1896)和 微镜观察病株分离物 的粒体形态 ，间接 ELISA检测 Fukdshi(1931，1934)分别描述…。RDV为多分基因 病株分离物，表 明两地病株病原为 RDV。应用已报 组病毒，具有 12条长度不等的双链 RNA(dsRNA)， 道 RDV．s8基 因设计合成引物 ，对病株分离物进行 病毒粒体为等轴球状粒体 ，直径 69．3nm。不同地 区 免疫捕捉多聚酶链式反应 (IC．PCR)扩增 、克隆和测 的RDV分离物核酸序列有较大差异 ，引起 的症状也 序分析 ，表明两地 RDV分离株在 s8基 因序列同源 不相 同，即不同分离物显示 出致病力 的差异。关于 性上有较明显的差异。对两地病株发病过程观察表 RDV侵染水稻植株的细胞病理 ，仅有报道指出其病 明，云南病株矮化的程度显著低于浙江病株 ，显示两 毒分布于薄壁细胞和韧皮部细胞的细胞质 中；或病 地病毒分离株的致病力差异较大。两地分离株分别 毒粒体聚集在管状结构 中，在病毒基质 中直径为 命名为 RDV云南分离株 (RDV．YN)和 RDV浙江分 50nm的粒体可能是未成熟 的病毒粒子 。J。关于 离株 (RDV．ZJ)。 RDV的胞间运动，是 由s6编码 的非结构蛋 白结合