盐离子浓度对hela细胞内提取的“30nm”染色质结构影响的电镜观察.pdfVIP

第 31卷 第 3期 电 子 显 微 学 报 Vo1．31．No．3 2012年 6月 JournalofChineseElectronMicroscopySociety 2012．O6 文章编号 ：1000—6281(2012)03—0243—08 盐离子浓度对 HeLa细胞内提取的 “30nm染色质 结构影响的电镜观察 李 宁 一，李晓敏 ，关宏斌 ，朱 平 ，黄晓星 (1．山东大学威海分校海洋学院，山东 威海 264209； 2．中国科 学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室，北京 100101) 摘 要 ：染色质是遗传信息发挥作用的重要处所 ，其结构受到了广泛的关注。研究人员基于不 同的实验材料和方 法提 出一些30nm染色质纤维结构模型，但并没有形成一个统一的结论 。本文选择人源 Hela细胞作为实验材料 ， 综合前人 的实验方法 ，从细胞 内提取纯化染色质 “30lqm”纤维并进行 电子显微观察 ，在不 同Na 离子浓度盐溶液 中 对 Hela细胞染色质 “30nm”纤维结构形态及折叠紧密程度 的影 响进行 了分析。结果表 明，在 0～100mmo1／LNa 之间，随着盐浓度 的升高，染色质结构折叠呈现逐渐紧密的趋势 。与此 同时，在提取染色质纤维的过程 中可 以通过 调节 Na ，ca“，Mg 等盐离子浓度抑制 Hela细胞 内源性核酸酶 的活性 。本文结果为进一步研 究3013_111染色质纤 维的高级结构提供 了有益 的信 息。 关键词 ：Hela细胞 ；“30nm”染 色质纤维 ；电子显微 中图分类号 ：Q243；Q336 文献标识码 ：A 染色体是所有遗传信息的载体。为了在有限的 可以将连接 DNA进行扭 曲折叠 ，从而形成6个核小 细胞核空间内存储大量的遗传信息，真核生物对 体为一圈的螺线管结构。而 Woodcock等 则提出 DNA进行了一系列 的包装和折叠。研究者普遍认 了一个 “连接 DNA决定 ”的Two．start结构模型。该 为 ，染色体的最基本组成单元是 由DNA缠绕在组蛋 模型强调连接 DNA的直线存在形式 ，认为相邻核小 白八聚体上形成 的核小体 ，多个核小体形成 “串珠 体之间的作用力并不足以扭 曲连接 DNA，核小体是 状”结构并在空间折叠形成 30nm 的染色质纤维， 以zig—zag的排列方式分布，进而折叠形成螺旋带状 然后进一步密集堆积形成染色体 ¨’。作为遗传信 的染色质纤维。总体而言，这些模型的提 出都基于 息的储存 、转录、修复等重要过程 的发生地 ，染色质 研究者对 自己实验结果的理解 ，但获得构建模型的 结构的重要性不言而喻。但 由于染色质本身结构的 实验基础数据 的条件和环境却并不完全统一 。 复杂性及研究手段 的限制 ，对染色质高级结构 的研 同时，在整个染色质的高级结构研究中，盐离子环境 究并没有取得很大的进展 。在过去 30年 的研究 的变化对研究结果的影响贯穿始终 。盐离子浓度的 中，研究人员提出了一些类似但又存在细微差别 的 高低不仅影响着染色质纤维片段的提取还影响着染 结构模型 。由于这些结构模型的提 出基于不 同 色质纤维结构的形态。因此 ，染色质结构形态 的差 的实验材料和方法 ，还没有得到研究者广泛的认可 ， 异除了归因于核小体之 间的作用力 、DNA的折叠形 染色质纤维 的整体结构到 目前为止仍然存在争 式及连接蛋 白H1等决定 因素的影响外 ，盐环境 的 论 o 差异也起到了至关重要的作用。 在 目前 的染色质高级结构研 究 中，“one．start” 蛋白质 x射线 晶体学方法是当前最主要 的结 和 “t