原子力显微镜磁驱动轻敲模式在活细胞成像中的应用研究.pdfVIP

维普资讯 第 27卷 第 4期 电 子 显 微 学 报 Vol一27．No．4 2008年 8月 JournalofChineseElectronMicroscopySociety 2oo8一O8 文章编号：1000—6281(2008)04．031l—O5 原子力显微镜磁驱动轻敲模式 在活细胞成像中的应用研究 孙全梅 ，陈 龙 一，陈佩佩 ，韩 东”，冯喜增 ，赵克森 (1．南方医科大学病理生理教研室，广东 广州 510515； 2．南开大学生命科学学院生物活性材料教育部重点实验室，天津 300071； 3．国家纳米科学中心 纳米生物医学成像与表征实验室，北京 100190) 摘 要：应用 MI公司最新发展 的磁驱动轻敲模式(MACmode)对体外培养成纤维细胞系3T3细胞进行在位成像研 究。分别用力常数为 0．95N／m及 0．03N／m的微悬臂进 行磁 驱动轻敲模 式成像 ，并与接 触模式进行 比较 。同时研 究了固定细胞与活体细胞之 间的形貌差异，结果显示 ，利用上述两种微悬臂探针 ，磁驱动轻敲模式均可获得高分 辨像。与接触模式相 比，磁驱动轻敲模式对活细胞的影响较小，在细胞膜表面微结构及细胞 内亚结构成像方面 ，有 明显优 势。而接触模式 由于其施 力方式，使活细胞应 力纤维应激性绷 紧，更适合于对 活体 细胞 应力纤维的成像研 究。固定细胞与活细胞表面形貌存在较大差异，在生理环境下 ，进行活细胞检测更能 了解细胞的真实状况。 关键词：原子力显微镜 ；磁驱动轻敲模式 ；接触模式；细胞 ；成像 中图分类号 ：Q24；TG115．215．7 文献标识码 ：A 原子力显微镜 (atomicforcemicroscope，AFM)是 像过程中针尖产生的侧 向力对样本表面的损伤，更 扫描探针显微镜 (scanningprobemicroscope，SPM)家 适合对活细胞等柔软物体进行非破坏性成像 。但 族中的一员 。它采用带有针尖的并对微弱力极其 使用轻敲模式扫描成像时，常规采用的是压 电陶瓷 敏感 (可对小于 lnN的力进行表征)的微悬臂对样 驱动微悬臂振动，驱动力 自基座经 由微悬臂根部传 本表面进行扫描成像 。针尖的最外层原子与样品表 递至顶部的针尖处。在液态中，特别是在阻尼较大 面原子之间的相互作用力使微悬臂发生形变或改变 的高粘度细胞培养液中进行扫描时，往往需要使用 其运动状态。一束激光经由微悬臂的光滑背面反射 力常数较大的微悬臂探针，并施加较大的驱动力。 到位置灵敏探测器上，通过检测微悬臂的偏转 以获 同时 ，在谐振峰的参数选择时也 比较 困难 。以上诸 得样品形貌和作用力等信息。AFM成像方式独特 ， 因素限制了此模式在生理环境 中对活细胞的成像研 检测时样本不需要特殊处理 ，在大气或液体等多种 究。 环境中即可进行纳米尺度的高分辨成像。这些特点 近期发展 的新 型轻敲模式——磁驱动轻敲模 使得 AFM能更广泛地应用于生物样本 ，如 DNA 、 式 ，利用交变磁场直接驱动背面镀有磁膜 的微悬 蛋白。及细胞 j等的检测，为生物医学领域高分辨 臂 ，大大提高了轻敲模式的实效性，特别是在液体环 形态学研究提供了一种崭新的手段。 境下 ，由于可以实现对微悬臂的精微控制，允许作者 接触模式 (Contactmode)和轻敲模式 (Tapping 在扫描成像中，使用力常数更小 的微悬臂及更小的 mode)是 AFM的两种主要工作模式。接触模式 ：针 驱动力。此特点大大提升了轻敲模式在生理环境下 尖和样本表面始终接触 ，利用互相接触原子 的电子 对生物样本成像的优势。已有学者利用该模式对生