罗非鱼三种17β羟类固醇脱氢酶17βHSD117βHSD317βHSD8的克隆、表达及其酶活性鉴定.pdfVIP

罗非鱼三种17p一羟类固醇脱氢酶(17p—HSDl，17D— HSD3，1 713一HSD8)的克隆表达及酶活性鉴定 学科专业：动物学 研究方向：分子内分泌学 指导教师：王德寿 作 者：周林燕 内容摘要 哺乳类1713．羟类固醇脱氢酶通过催化17一酮基类固醇和17．羟基类固醇之间 雌激素和雄激素合成的关键性酶，其中1715一HSDl在卵巢的表达水平很高，并 能高效地催化雌酮到雌二醇的转化；而1713一HSD3是精巢特异的，并特异性地 催化雄烯二酮到睾酮的转化。1713．HSD8主要在肾脏和性腺表达，而它的突变导 致小鼠多囊肾。在本实验中我们克隆了罗非鱼这三种类型的17凸．羟类固醇脱氢 分布，构建重组质粒进行离体表达，并通过薄层色谱进行酶活性分析。 的氨基酸和核甘酸序列，并在序列保守区域设计简并引物，然后分别以罗非鱼 片段。而1713一HSD8的3’端片段从罗非鱼EST(expressionsequencetags)克隆中 同源性。 1715一HSD8在雌雄的性腺、鳃、心脏、肝脏、肠和肾脏都有高