林麝IL-2细胞因子的克隆、分析与表达.pdf

四川大掌坝士论文 由于林麝IL-2在其受体结合域上与绵羊IL-2的氨基酸残基不同，而且与水 牛IL．2之间存在蛋白翻译后修饰的很大差异(软件预测)，因此我们对林麝IL-2 基因在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达情况进行了研究和比较。 导下，该基因在大肠杆菌中得到了表达，SDS．PAGE分析得到了约41kD的诱 导表达带，与融合蛋白的预计分子量一致，表达量约占细菌裂解物的25％。 选正确构建的重组质粒并转化毕赤酵母GSIl5细胞，G418抗性筛选得到了 鉴定，得到多个阳性克隆，对这些克隆进行蛋白质表达和SDS．PAGE分析，结 果仅有一株重组酵母在甲醇诱导6d后的上清中检查到了的大约为18kD的诱 导表达带，且表达量极小，其余菌株均未检测到诱导的特异表达带。这表明林 麝11．,-2在毕赤酵母中的表达是低水平的，其在大肠杆菌中的表达相对较高。 关键词：林麝；自介素．2；克隆；原核表达：真核表达 四川大学硕士论文 and of Expression Cloning、Characterization musk Interleukin一2fromForest - ． berezovskii)‘ Biology Major：Cell Bin GraduateStudent：Lai Tutor：Zou Fangdong all animal Abstract：Musk not as deer(Moschusspp．)isonlyprotectedendangered Law Iin as undertheWildAnimalProtectionas alsoclassed China,but Category animalsinchinaforitsase勰an oneofthemostvaluedeconomic in ingredient musk hasbeen traditionalChineseandKorean deer medicine．Although captured andfannedforabout in numberofits andthe China,the population fif哆years treatmentsofdifficult bothr