《miR-106b表达对人肝细胞肝癌细胞增殖能力的影响.》.pdf

中华肿瘤杂志2014年7月第 36卷第7期 ChinJOneol，July2014，Vo1．36，No．7 · 489 · ． 基 础 研 究 ． miR一106b表达对人肝细胞肝癌细胞 增殖能力的影响 申刚 嘉红云 陈德基 张靖 【摘要】 目的 探讨miR一106b的表达对肝细胞肝癌(HCC)细胞增殖的影响及其可能的作用机 制。方法 实时荧光定量PCR检测 HCC细胞系和正常肝上皮细胞中miR-106b的表达。以miR一106b 模拟物和miR-106b抑制物转染 HepG2和 QGY-7703，采用 四甲基偶氮唑蓝法、克隆形成实验和软琼 脂增殖实验检测 miR一106b的表达对QGY-7703和HepG2细胞增殖能力的影响，BrdU竞争掺人法、流 式细胞仪检测细胞新合成 DNA的能力和细胞周期 的变化。结果 HepG2、QGY-7703、BEL-7402、 MHCC97H、HCCC-9810、Hep3B、MHCC97L和Huh7细胞中miR-106b的相对表达水平分别为5．37± 0．35、8．45±0．75、19．22±1．74、1I．93±1．26、17．03±0．97、4．19±0．67、7．94±1．35和 3．82±0．87， 与正常肝上皮细胞THLE3中miR．106b的表达水平比较，差异均有统计学意义 (均P0．05)。转染 3d后，过表达miR-106b的HCC细胞增殖加快，抑制 miR一106b的HCC细胞增殖减慢。过表达 miR一 106b的HepG2和QGY-7703细胞形成克隆的数 目分别是对照组的(4．13±0．75)倍和 (3．78±0．47) 倍，在软琼脂中形成1．0mm克隆的数 目分别为 (147．73±15．56)个和 (138．87±15．58)个；抑制 miR一106b表达HepG2和QGY-7703细胞株形成克隆的数 目分别是阴性对照组的(0．18±0．05)和 (0．244-0．07)倍 ，形成 1．0mm克隆的数 目分别为 (23．29±7．14)个和(20．60±8．07)个。与对照 组比较，差异均有统计学意义 (均 P0．05)。BrdU竞争掺入实验结果显示，过表达 miR-106b的 HepG2和QGY-7703细胞中BrdU阳性率分别为 (51．89±4．91)％和(54．74±6．10)％，抑制miR-106b 表达的HepG2和QGY-7703细胞的Brdu阳性率分别为 (6．48±3．15)％和 (7．52±2．03)％，与亲代 细胞的BrdU阳性率比较 ，差异均有统计学意义(均P0．05)。流式细胞仪检测结果显示，过表达 miR一106b使 HepG2和QGY-7703细胞s期细胞所占比例分别由29．93％和31．04％，升高到56．76％ 和57．22％。抑制 miR一106b表达的HepG2和 QGY-7703细胞 中S期细胞所 占比例为 19．43％和 19．92％。结论 miR．106b过表达可促进HCC细胞增殖和转移，其机制可能是通过促进细胞进入 S 期、抑制细胞凋亡实现。 【主题词】 肝肿瘤； 细胞增殖； 细胞凋亡；微 RNAs E跚 ofmiR．106b expression on theproliferation ofhuman hepatocellular~ rcmoma cells Shen Gang ，JiaHongyun，Chen04，Zhang ． DepartmentoflnterventionalRadiologyand ‰ c以 Malformations。GuangzhouWomenandChildren5MedicalCenter，Guangzhou510263，China Correspondingn r：ShenGa ng ，Email：gs1975@ ．corn 【Abstract】 objective ToinvestigatetheeffectsofmiR一106bexpressionontheproliferationof humanhepatocellularcarcinomacells．Methods Rea1．timePCR wasusedtodetecttheexpressionofmiR一 106binhumanhepatocellularc~cinoma(HCC