生物实验《检测生物组织中的糖类蛋白质脂肪》课件(新人教版必修).ppt

蛋白质的鉴定----双缩脲试剂 问题探讨: 1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？ * 斐林试剂 苏丹Ⅲ 橘黄色 红色 砖红色沉淀 紫色 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂 鉴定物质 试剂 实验现象 还原性糖 脂肪 蛋白质 淀粉 碘 蓝色 必修1第18～19页 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 实验原理 选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对 显色的干扰)，苹果、梨最好 。 实验流程(步骤) 1.可溶性还原糖 制备组织样液： 制浆：去皮、切块、研磨， 过滤：（用单层纱布） 取液：（２mL） 显色反应 现象： (用前混匀) 50～65.C水浴 加热2min 还原糖的检测和观察： 还原糖的检测结果 2.脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片 制片： ①选取最薄的薄片移至载玻片中央 ②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 染液2 － 3滴，染色 ２－３min ③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色 (多余的苏丹Ⅲ ) ④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片 显微观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察 现象： 有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒 脂肪微粒 脂肪的检测结果 3.蛋白质的鉴定 选材与制备 组织样液： 黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液） ［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］ 显色反应 现象： 无色 紫色或紫红色 (创设碱性条件) (提供Cu2+) 蛋白质的检测结果 鸡蛋清溶液 NaOH 溶液 滴加CuSO2 溶液, 每次滴加均需摇匀 结果显示: 紫色 4.淀粉的鉴定 取材：马铃薯匀浆 检测： 碘液2滴 现象： 摇匀后变成蓝色 作对照 2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能 过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。 深化 溶液呈紫色 双缩脲试剂NaOH和CuSO4 蛋白质的鉴定 砖红色沉淀 斐林试剂NaOH和CuSO4 可溶还原糖的鉴定 结果 加热与否 方法 溶液浓度 原理 试剂及成分 比较项目 4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？ 新配制的 Cu(OH)2 溶液 在碱性 环境下 的Cu2+ NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.05g/mL NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.01g/mL 先把NaOH 溶液和CuSO4 溶液混合， 而后立即使用。 先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量) 水浴 加热 不 需 要 小麦种子 花生种子 黄豆 胡萝卜 黄桃 梨 各种可供实验的材料 ①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是 ，理由是梨的组织细胞 ，你打算用什么试剂鉴定? 。 ②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为 ，你打算用什么试剂鉴定? . [例] 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题： 梨 颜色为白色，并且糖含量较高 斐林试剂 脂肪含量不如花生高，也不容易做切片 用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂 * * *