喜树组织培养体系建立及研究.pdf

本研究受到下列项目资助： 贵州省科学技术基金资助项目编号 贵州省科技厅专项基金项目编号黔科合字 (2003)JN012号 在读期间发表论文及参加学术会议 情况： 1．喜树茎尖组织培养与植株再生吕立堂朱冬雪赵德 刚中草药2004，35(6)293—295 2．喜树快速繁殖与再生体系的建立吕立堂朱冬雪赵 5／6829—830 德刚分子植物育种2003 3．喜树碱生物合成相关酶及基因调控研究进展贵州 大学学报(接受) 4．参加学术会议：2003年11月22日一11月27日，参 加热带亚热带植物生物多样性与基因发掘和利用大 会(海南三亚) 喜树组织培养体系建立的研究 喜树组织培养体系建立的研究 内容摘要 acuminata)是珙桐科(Nyssaceae)的一种落叶阔叶树， 喜树(Camptotheca 为优良的园林绿化树种，喜树还可以产生具有抗肿瘤作用的喜树碱。 aeuminaca．)为材料，建立了带芽茎段的 本文以喜树(Camptohteca 快速繁殖体系、子叶节的快速繁殖体系以及愈伤组织培养体系，为喜树碱高 产株系的优株快繁，喜树愈伤组织细胞悬浮培养，及喜树遗传转化研究奠定 基础。 带芽茎段快速繁殖体系：以成年喜树带芽茎段为外植体，采用75％酒精 制微生物的污染。以MS+f-BA I．Omg／L+NAA0．5mg几为腋芽诱导培养基，腋 芽萌发率高，达75％以上，20d腋芽伸长到1．5ca左右。船+6一BAO．5=g／L 上诱导丛生芽，20d后得到8个芽／1个腋芽。 子叶节快速繁殖体系：以7d龄的无菌苗子叶节胚芽区域为外植体，以 NN∞附加6一BA(0．2mg／1)．IBA(0．05rag／1)，AS(afeninesulfate，lOmg／1) 的培养基对丛生芽的诱导与增值效果最佳。 愈伤组织培养体系：子叶、幼叶、胚轴均可诱导愈伤组织，但诱导愈 伤组织的诱导率，出愈时间以下胚轴优于子叶，子叶优于幼叶。在光照培养 组织生长较快，20d培养的愈伤组织生长速率为1121％，在黑暗培养条件下， 愈伤组织生长最佳培养基为KS+NAA4mg／L+6一BA0．5mg／L+2，4-D0．6mg／L。 愈伤组织生长适宜的蔗糖浓度为20-309／L，最适生长PH为5．8-6．2。下胚 轴来源的愈伤组织在分化培养基NN*+6-BAO．2 mg／L+IBAO．1=g／L+ASlO mg／L上分化出芽，分化率为90％以上。 丛生芽在MS附加0．5mg／L的6一BA的培养基上增殖，每20d在原培养 基以8个芽／单芽的速度增殖。单芽的壮芽培养基为： B5+0．56一B A=g／L+ KTO．1 O．1 mg／L。生根培养基为BS+IBA0．5=g／L+KTmg／L+AslO=g／L。 生根率率达90％。 关键词：喜树，组织培养，带芽茎段，茎尖。愈伤诱导，再生． 喜树组织培养体系建立的研究 Abstract kind acuminalais ofdefetiateand is Camptotheca a latifoliate慨which to acwninata generate belongNyssaceae．CamptothecaCamptotheein(CPD，all this axi budfro