伴放线放线杆菌外膜蛋白的提取及生物学作用的初步的研究.pdf

伴放线放线杆菌外膜蛋白的提取及其生物学作用的初步研究 摘 要 目的： 提取伴放线放线杆菌外膜蛋白，将不同浓度的外膜蛋白溶液作用于小鼠巨噬细 胞，比较不同血清型伴放线放线杆菌外膜蛋白电泳结果的差别，观察不同浓度的外 膜蛋白对小鼠巨噬细胞分泌IL．113的影响。 方法： 151，培 l取3种不同血清型的伴放线放线杆菌；l{R糙型菌株D7S、SA716和SAI 养三天后观察菌落生长状况。 2分别培养收集菌细胞，并配置菌细胞悬液，利用SDS．PAGE电泳和考马斯蓝 染色方法记录电泳条带的分布。 3采用超声破碎及超离心技术提取三种血清型伴放线放线杆菌的外膜蛋白，利 用SDS．PAGE电泳和考马斯蓝染色技术分析鉴定三种外膜蛋白的分子量。 4使用三种不同浓度的外膜蛋白溶液刺激对数生长期的小鼠巨噬细胞I毪64．7， 设立空白对照组和3个不同浓度外膜蛋白实验组，分别在第12小时和第24小时时采 用ELISA检测每孔中IL．16含量，实验重复3次。spssl1．5统计软件分析不同浓度 和不同作用时间IL一113的差异。 结