凡纳滨对虾促雄性腺结构及性别分化研究.pdfVIP

凡纳滨对虾促雄性腺结构及其性别分化的研究 摘要 vannamei)雌雄之间的某些生物学或经济学性状(如生 凡纳滨对虾(Litopenaeus 长速度、个体大小等)存在显著差异，性成熟后个体大小相差悬殊。若实现他们的单 性化养殖，则可以缩短养殖周期，提高产量。因此深入开展凡纳滨对虾性别决定因子 及其性别决定机制的研究是十分必要的。本文利用生化技术和组织学手段等，研究了 凡纳滨对虾促雄性腺的结构及其性别分化时期：检测了眼柄粗提物的GIH Hormone)活性；并且采用不同浓度的眼柄粗提物对不同时期的凡纳 (Gonad．inhibiting 滨对虾仔虾进行了浸泡处理，获得了雌性比例较高的群体。为凡纳滨对虾性别决定机 制的研究提供了基础材料，表明了通过性别控制实现凡纳滨对虾单性化养殖的可能 性。 利用显微观察和组织学连续切片的方法研究发现：凡纳滨对虾的促雄性腺埋于精 荚囊端壶腹外侧的肌肉中，呈不规则的片状，用Harris苏木精染色，整体被染成深蓝 色。组织切片观察发现：体长为7em左右的凡纳滨对虾雄虾的促雄性腺细胞多为卵圆 形，分散排列在肌肉中，细胞核比较大，但是核质疏松，被染成浅蓝色，核仁1--2 个清晰可见，细胞界限较清晰；体长为9cm左右的凡纳滨对虾雄虾的促雄性腺，有两 种形态的细胞：一种核质致密嗜碱性非常强，细胞核被染成深蓝色，核仁很难辨认， 大多呈圆形或卵圆形；另一种细胞与体长为7cm的结构相似，细胞核内的电子密度比 7cm的多，两种细胞的数量相差不多；体长为12em左右的凡纳滨对虾促雄性腺，成团 状排列在精荚囊的一侧，各个细胞团大小形状不一，每个细胞团外面都有一层很薄的 结缔组织，第一种类型细胞居多；体长为15cm左右繁殖过后的凡纳滨对虾的促雄性 腺，大多数腺体细胞的细胞核固缩，细胞质呈空泡状。可见促雄性腺的结构是逐步发 育的，而且它的结构也会随着精巢的发育而有所不同。 对性腺未成熟且剪掉单侧眼柄的雌虾注射不同浓度(0．001、O．01、O．1、1个眼 柄／m1)的眼柄粗提物，每次注射0．2-0．3ml，每隔一天注射一次。在注射三次后的第 三天，将虾体解剖取出卵巢，在倒置显微镜下观察各组卵巢卵母细胞的直径。经统计 发现：浓度为0．001个眼柄／ml的实验组卵巢卵母细胞的直径显著小于对照组(只剪单 ／ml的实验组卵巢卵母细胞直径极显著小于对照组(P≤O．01)。空白组(注射甲壳动 物生理盐水)卵巢卵母细胞的直径略小于对照组，但是并未达到统计显著水平(P I 0．05)。四个实验组卵巢卵母细胞的直径皆小于空白组，浓度为0．001个眼柄／ml的实验 组以外，其余三个实验组与空白组比较卵巢卵母细胞直径的差异均达到显著水平(P 0．05)。这说明：注射引起的虾体损伤对卵巢发育有一定的影响，但是影响不大， 凡纳滨对虾眼柄粗提物具有6IH活性。 通过组织学连续切片与扫描电镜相结合的方法，对凡纳滨对虾早期的性别分化进 行了观察和研究。发现：凡纳滨对虾外部形态的性别分化最早发生在仔虾后第37天， 此时在扫描电镜下可以观察到雄性附肢的芽基，第45天光镜下可以观察到交接器；仔 虾后24天出现原始生殖细胞(PGCS)，位于背大动脉的两侧以及围心腔膜的腹面， 细胞个体以及细胞核明显比周围的细胞大，具有强嗜碱性，细胞核为圆形或椭圆形， 核内染色质清晰可见，随着生殖腺的发育，在第43天出现了生殖管，第55天生殖腺可 以区分为精巢和卵巢。 个眼柄／m1)的眼柄提取物，对凡纳滨对虾仔虾进行24h的浸泡，同时在处理次数上设 置梯度，每隔五天浸泡一次，分一到三次不等。被浸泡过的凡纳滨对虾养到一定规格 后，统计实验组和对照组群体雌雄性别比例。发现对照组雌雄比例约为1：l；在仔虾 后17d处理的，除了浓度为0．001个眼柄／ml的实验组雌性率达到80％外，其余三个实 的实验组雌性率为75％以外，其余三个浓度组都在70％左右；在27d处理的，除了浓 度为0．1个眼柄／ml的雌性率为73％以外，其他三组雌性率都在60％左右，效果不明显。 总之，随着处理时间的延迟，凡纳滨对虾的雌性率降低，但整体雌性率还是高于对照 组，只是仔虾后17天和22天处理的各实验组的雌性率显著高于对照组(P0．05)，另 外随着处理次数增多雌性率降低。 关键词：凡纳滨对虾，性别分化，促雄性腺，眼柄粗提物，性别控制，雌性率