生物催化剂技术.ppt

* 第八章 生物催化技术 8.1 生物催化剂的类别 类别——起催化作用的游离或固定化细胞或酶的总称 8.2 生物催化反应的特征 （1）催化效率极高 传统化工催化剂用量0.1-1%，酶用量10-40-10-30 % （2）选择性极高（相对/绝对专一性） 一种酶只能催化一种底物，（绝对专一性） 一种酶能催化一类结构相似的底物，（相对专一性） （3）催化条件极温和 常温、常压、PH=5-8（通常在7） 绝对专一性实例 相对专一性实例 键专一性或基团专一性—— 酯酶可对所有含酯键的酯类化合物进行催化 8.3 酶的系统分类及命名 目前已鉴定出2000多种酶，并得到200多种结晶体。 分类 （1）氧化还原酶 EC1 氧化还原 （2）转移酶 EC2 从一个底物转移到另一个底物 （3）水解酶 EC3 水解 （4）裂解酶 EC4 裂解 （5）异构酶 EC5 异构化，分子重排等 （6）连续酶 EC6 也称合成酶 命名：习惯命名、系统命名、系统分类命名 系统分类命名——EC后缀4位数字（例如EC3.1.1.3） 第一位数字——表示酶的类别 第二位数字——表示底物中被催化的基团或键的特点 第三位数字——表示亚类类型 第四位数字——表示登记号 单纯酶 由简单蛋白构成的酶 淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、脲酶等 结合酶 除蛋白（酶蛋白）外，还有非蛋白成分（辅酶或辅因子） 如大多数的氧化还原酶 辅酶/辅基的分类 （1）无机金属元素 Cu、Zn、Mn、Mg、Fe等 （2）小分子有机物 维生素、铁卟啉 辅酶/辅基只有与酶蛋白相结合才显活性 在反应中起传递氢、电子、原子或化学基团的作用 一种酶蛋白通常只能同一种辅酶相结合 而一种辅酶却能与多种不同酶蛋白相结合成特异性强的全酶 辅酶中的某些金属还能起“搭桥”的作用 8.4 酶的功能与反应动力学 酶功能——由酶活性中心和辅酶因子构成 酶活性中心——酶蛋白中与催化相关的特定区域 （通常在酶分子的表面，具有特定的空间结构） 必需基团——酶活性中心中特定的化学基团（起催化作用） 辅酶因子——通常是酶维持空间结构和活性中心的必需基团 有的直接参与活性中心的催化作用 有的只起传递氢、电子、原子和化学基团的作用 它与酶蛋白的结合比较疏松 酶催化过程——先接触底物，再与底物形成复合体 酶催化机理——钥匙学说、诱导契合学说、过渡态中间物理论 钥匙学说——酶与底物形成严格的互补关系 诱导契合学说——底物诱导酶蛋白使其构象发生有利于结合底物 导致二者在构象上形成互补关系 过渡态理论——酶与底物结合后形成过渡态中间物，然后底物 向产物转化。 只有酶活性中心与过渡态中间物才有互补关系 见图8-1 酶缺点：非常娇嫩，对反应环境非常敏感，尤其怕热 酶改造 （1）在蛋白质分子中引入二硫键，可大大提高热稳定 性可适应有机溶剂 （2）酶的体外定向进化（也称实验分子进化） 通过人为地创造特殊条件，模拟自然进化机制（如 随即突变、重组、自然选择等）定向培养所需的突 变酶体，改进酶的热稳定性、活性、选择性等 该法属于非理性设计法，它不需要预先知道酶的空 间结构和催化机理 。 酶反应动力学——酶动力学受温度、PH值、底物浓度、酶用量及 抑制剂影响，其中底物浓度影响较大。 单底物典型变化情况见图8-2 米-曼方程 8.5 影响酶催化反应的多种因素 （1）温度——影响速率及酶变（酶有最适宜温度） （2）PH值——影响酶及底物的解离、酶分子构象及活性 （3）激活剂——酶及酶原都可以被激活 激活剂可以是金属离子或某些阴离