银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾小管上皮-间充质细胞转分化影响机制及研究.pdf

题目 银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾小管上皮- 间充质 细胞转分化的影响与机制研究 研究生：郑欣 导师：吴小南 教授 摘要 目的：探讨银杏叶提取物通过抑制氧化应激反应，保护糖尿病大鼠肾小管上皮细 胞免受氧化应激的损伤，从而抑制肾小管上皮- 间充质细胞转分化，减少细胞外 基质的沉积，延缓和逆转肾间质纤维化的可能机制。 方法：腹腔一次性注射STZ 造糖尿病大鼠模型，给予不同剂量的GBE 腹腔注射 干预，每天给药一次。8 周后，处死大鼠，测定空腹血糖、血肌酐(Scr)、尿素氮 (BUN)、24h 尿蛋白量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase ,SOD ）、丙二 醛（malondialdehyde ,MDA ）的含量。HE 、PAS 及MASSON 染色切片观察肾 组织病理变化，免疫组化观察肾组织 α-SMA(α-smooth muscle actin, α-SMA) 表达，Western Blot 检测I 型胶原(type Ⅰcollagen ,Col I)蛋白表达水平。 结果：（1）与对照组相比，模型组的空腹血糖、血肌酐、尿素氮和24h 尿蛋白量 明显升高，且都有显著性差异（P0.01 ），表明造模成功。与模型组相比，GBE 低剂量治疗组血肌酐、尿素氮与 24h 尿蛋白量有差异（P0.05 ），空腹血糖下降 不明显，GBE 中、高剂量治疗组空腹血糖、血肌酐、尿素氮和24h 尿蛋白则显 著降低（P0.01 ）。（2 ）与对照组相比，模型组大鼠肾组织SOD 活力显著性降低 （P0.05 ），MDA 含量显著性提高（P0.05 ）。GBE 低剂量组的SOD 活性与模型 组有显著性提高（P0.05 ），GBE 中、高剂量组SOD 活力得到进一步提高（P0.01 ）, GBE 低、中剂量组的MDA 含量与模型组相比有显著降低（P0.05 ），GBE 高剂 4 量组 MDA 含量得到进一步降低（P0.01 ）。（3 ）模型组大鼠肾组织炎症细胞浸 润、小管扩张、间质纤维化，与对照组相比，肾小管- 间质损伤指数明显升高 （P0.01 ），肾小管间质胶原相对面积显著增大（P0.01 ）。GBE 中、高剂量组肾 小管间质损伤明显减轻，肾小管间质胶原相对面积明显减少（P0.01 ）。（4 ）模 型组大鼠肾组织的 α-SMA 表达显著上调（P0.01 ），与模型组比较，GBE 低剂 量组α-SMA 的表达也有所降低（P0.05 ），GBE 中、高剂量组大鼠肾组织a-SMA 的表达明显减少（P0.01 ）,（5 ）模型组大鼠Col I 蛋白表达水平明显升高（P0.01 ）。 与模型组相比，GBE 低剂量治疗组Col I 蛋白的表达水平明显降低（P0.05 ）， GBE 中、高剂量治疗组Col I 蛋白的表达量则进一步降低（P0.01 ）。 结论： 1. GBE 可降低糖尿病大鼠的血糖水平、血肌酐、尿素氮和24h 尿蛋白，改善大 鼠肾功能。 2. 糖尿病大鼠存在氧化应激，GBE 可降低糖尿病大鼠肾组织中MDA 含量，提 高SOD 活力，抑制氧化应激反应。 3. GBE 可减少成肌纤维细胞的标志性蛋白—α-SMA 的表达，减少细胞外基质成 分的沉积，抑制EMT 的发生，延缓和改善肾间质纤维化。 关键词：银杏叶提取物 糖尿病肾病 氧化应激 肾小管-间质转分化 5 ABSTRACT Effect and Mechanism of Ginkgo Biloba Extract on Renal Tubular Epithelial –Mesenchymal-Transition in Type 1 Diabetes Rats Student : Zheng Xin