酶法制备马铃薯淀粉磷酸寡糖及其相关酶系的研究.pdf

摘 要 磷酸寡糖(Phosphoryl 与磷酸根共价连接的一种新型的功能性低聚糖。马铃薯磷酸寡糖是从马铃薯淀粉酶解 液中得到的含有磷酸基团的麦芽低聚糖。除了具有一般低聚糖的生理功能外，还具有 促进钙，铁等矿物质吸收的功能。 本文阐述了以马铃薯淀粉水解液为原料，采用酶法制备磷酸寡糖。并且比较了马 铃薯淀粉水解法，马铃薯淀粉磷酸酯化水解法，玉米淀粉制备麦芽低聚糖酯化法等几 种不同的制备方法。其中玉米淀粉制备麦芽低聚糖酯化法所得到的磷酸寡糖得率为最 大(3．989％)。 本文以纤维素阴离子交换树脂为柱材料，分离出了一组磷酸寡糖，对其组分进行 了研究，发现脱去磷酸根的POs主要是由麦芽三糖，麦芽四糖，麦芽五糖，麦芽六 糖等组成。计算出P01与P02部分的磷酸根聚合度分别为3．98和5．78。 除此之外，由于水解马铃薯淀粉存在所用的耐高温0【．淀粉酶、真菌Q．淀粉酶、 普鲁兰酶所需的最适pH、温度差异大，以及上述三种酶需由三种菌株产生、生产成 本较高等问题，我们对一组能同时产生酸性a．淀粉酶、糖化酶、异淀粉酶的黑曲霉菌 种进行了单因子试验。筛选到一株产酸性a．淀粉酶较佳的菌种PZ301。并对其液态、 固态发酵进行了条件研究，确定最佳产酶因素，其中液态发酵的耐酸性0【．淀粉酶最高 酶活为38．29IU／mL，糖化酶活为57．58IU／mL，异淀粉酶活为47．6U／mL。固态发酵 的耐酸性a．淀粉酶最高酶活为779．9 U／g干曲，糖化酶活为1215．8IU／g干曲，异淀 粉酶活为357U／g干曲。 采用上述黑曲霉产生的复合酶系发酵所得酶液，进行马铃薯淀粉水解，水解不存 在pH、温度调节和多个产酶菌种等问题，所需反应时问相对传统制备磷酸寡糖工艺 减少。在加入实验室自制酶液50 h，液化较完全。 mL／g时，作用5 磷酸寡糖是一组含有磷酸根的麦芽低聚糖，其分子量介于600．1500之间，因此 使用纳滤设备可以进行分离。实验室用制备的马铃薯淀粉酶解液进行纳滤，此种方法 较树脂有安全，量大的优点。淀粉水解液通过2000道尔顿分子量膜截留与500道尔 顿分子量进行截留，一次浓缩，最终得到含有磷酸寡糖的麦芽低聚糖，其中麦芽低聚 糖中磷酸寡糖的含量约占1／10。寡糖的回收率为89．23％。 最后对纳滤产物进行核磁共振氢谱的检测，证明纳滤产物中含有麦芽三糖，麦 芽四糖，麦芽五糖，麦芽六糖和麦芽七糖等寡糖组分。 关键词：马铃薯淀粉；磷酸寡糖；黑曲霉复合酶系；纳滤；核磁共振氢谱 Abstract malt isanewkindoffunctional Phosphoryloligosaccharide to isa residueslinkes oligosacchafide glucosyl phosphatecovalently．Potatophosphoryl can the ofmineral of absorption maltooligosaccharides．Itpromote type phosphate ascalciumandiron the functionsof substancessuch etc，besidesgeneral oligosacchandes． of starchasraw