榕树籽多糖的提取、结构的分析及其抗氧化、抗肿瘤活性的研究.pdfVIP

摘 要 榕树籽为桑科 (Moraceae)榕属 (Ficus)植物榕树（ Ficus macrocarpa Linn.f.）的干燥种子，我国主要分布在广西、海南、贵州、广东、福建等地。 在印度、马来西亚、越南等国也分布广泛。全球主要分布在热带和亚热带地区。 目前，在榕树的气生根、茎、叶、芯材等化学成份以及含量、药理等方面取 得了一定的研究成果。但对于榕树籽多糖的研究尚未见文献报道。 本论文主要由三部分组成，第一部分为榕树及多糖的化学成分研究进展；第 二部分为实验部分，包括榕树籽多糖的提取、分离、纯化、以及初步的结构分析； 最后一部分为活性试验部分，包括榕树籽多糖的抗肿瘤活性和抗氧化活性的研 究。主要内容包括： 1.榕树籽多糖的提取、分离、纯化 本文采用均匀设计法优选提取榕树籽多糖的实验条件，得出榕树籽多糖的最 佳提取工艺为温度：100℃、时间：3h、料液比：1:60 （g/mL）。榕树籽经粉碎、 过 60 目筛、用石油醚、乙醇除杂质后，采用水提、醇沉后得暗红色榕树籽粗多 糖，提取率为 1.67%。再经过酶结合Savage 法脱蛋白、双氧水脱色后，透析、 醇沉后得半精品多糖 RSZ。最后采用Sephadex G-75 凝胶柱层析法纯化得到两种 多糖 RSZ1、RSZ2。运用比旋光度法和凝胶柱色谱法检测证明：RSZ1 为组分均一 的纯多糖，而RSZ2 为多组分混合多糖。 2.榕树籽多糖 RSZ1 的结构分析 4 本文采用黏度法测得榕树籽多糖RSZ1的相对分子质量为：4.68×10 。将RSZ1 用 TFA （三氟乙酸）完全水解后，经反应制备成糖腈乙酸酯衍生物，将此反应产 物加入乙酸乙酯和蒸馏水萃取三次，水相旋蒸至 1mL 左右，进行 GC-MS 分析，结 合高碘酸氧化、Smith 降解以及 IR、NMR 分析，结果表明：RSZ1 由5 种单糖组成， 分别为：鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖。根据峰面积比得知其含 量比为：1:2.735:5.184:2.232:26.992。多糖 RSZ1 存在 1→2、 1→6、1→4 糖 苷键，可能存在 1→3 糖苷键。 3.榕树籽多糖的抗氧化活性和抗癌细胞活性研究 本文采用 Fenton 体系测定多糖清除 ·OH 的能力、采用邻苯三酚法测定多糖 - 清除 ·O 能力，结果显示：RSZ、RSZ2、RSZ1 都有随着浓度的增大清除率增大 2 趋势，但总体来说，RSZ1 的清除羟基自由基和超氧自由基的能力要比 RSZ、RSZ2 要强。 本文采用 MTT 法测试了粗多糖、RSZ、RSZ1、RSZ2分别对 MGC-7901(人胃癌 细胞)、Hela(人宫颈癌细胞)、HT-29(人结肠癌细胞）、PC-3 （人前列腺癌细胞) 的作用，结果显示：这四种糖对所有细胞 IC 均大于100，说明榕树籽多糖对 50 上述四种细胞没有抗癌活性。 关键词：榕树籽 多糖 分离 纯化 结构分析 抗氧化活性 抗肿瘤活性 ABSTRACT The raw materials in this research was the seed of Ficus microcarpa. Ficus microcarpa, which belongs to Ficus family, mainly distributed in Guangxi, Hainan, Guizhou, Guangdong and Fujian province. Meanwhile, it was widely distributed in India, Malaysia and Vietnam etc. It was mainly distributed in tropical and subtropical regions in the world. The chemical composition, content and pharmacodynamics of the roots, stems ,leafs, cores of Ficus m