《Pi-ta+基因和几丁质酶基因双价基因导入水稻的研究 Pi-ta + Gene and Bean Chitinase Gene Transformation into Rice》.pdfVIP

西北植物学报，2013，33(10)：1953—1957 Acta Bot．Boreal．-Occident．Sin． 文章编号：1000—4025(2013)10—1953—05 Pi-ta+基因和几丁质酶基因 双价基因导入水稻的研究 张 秀1’2，钟巧芳1，付坚1，李定琴1，程在全¨ (1云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，昆明650223；2云南农业大学，昆明650000) Pi-ta+一Bchi转化到水稻愈伤组织中。经组织培养获得再生苗，再通过氯酚红显色法、PCR检测和抗稻瘟病鉴定法 获得抗稻瘟病的转基因植株，为进一步创建持久、广谱抗稻瘟病水稻新材料奠定基础。结果显示：(1)抗性愈伤组 株。(2)经氯酚红显色法和PCR对再生苗检测，‘中花11’、‘云资粳41’、‘云资粳43’的转化苗阳性率分别为66％、 43％和55％。证明2个外源基因已经整合到水稻基因组中。(3)对转化阳性植株温室接种稻瘟病病菌66b鉴定结 果显示，转基因植株较非转基因植株对稻瘟病的抗性明显增强，而且转Pi-ta+基因和几丁质酶基因双价的水稻植 株比转单价Pi-ta+基因或几丁质酶基因的水稻植株抗稻瘟病能力强。(4)氯酚红检测结果存在一定的假阳性， PCR检测结果更真实可靠，但氯酚红显色法方便、快速，结果观察直观，可对大量的转基因植株进行初步筛选。研 究表明，转Pi-ta+基因和几丁质酶基因双价基因的水稻植株具有更高的抗稻瘟病能力。 关键词：二价表达载体；Pi-ta+基因；菜豆几丁质酶基因；稻瘟病 中图分类号：Q789 文献标志码：A Pi-ta+GeneandBeanChitinase GeneTransformationintoRice ZHANG Xiul”，ZHONG Qiaofan91，FUJianl，LIDingqinl，CHENGZaiquanl’ Resources (1BiotechnologyGeneticResearchInstitute，Yunnanof 650223，China；2 AcademyAgriculturalSciences，Kunming Yunnan 650000，China) AgriculturalUniversity，Kunming orderto thericeblastresistance Abstract：In 43’，we improve of‘Yunzijing41’and‘Yunzijing bivalent vector 300一Pi-ta+一Bchiintoricecalli the expressionpCAMBIAl using tissueculturearetested CPR andriceblastre— method．Regenerationseedlingsthrough throughassay，PCR sistantmethodanda ofthesearedeterminedtobe laidthe assay part transgenicplants．Thisexperiment foundationfor the and blastresistancerice infuture．Results breeding10ngerhigher variety sista