《Prohibitin启动子中胆固醇活性作用位点研究 Cholesterol-sensitive action sites in promoter of prohibitin gene》.pdfVIP

·1821· [文章编号]1000—4718(2013)10-1821-05 董培1”， 蒋丽娟1， 郭胜杰1， 刘卓炜1， 李永红1， 尧 凯1， 秦自科1， 韩 辉1， 周芳坚1△ (1华南肿瘤学国家重点实验室，中山大学肿瘤防治中心泌尿外科，广东广州510060； 2广州医科大学附属第一医院广东省泌尿外科重点实验室，广东广州510120) [摘要] 向基因治疗中的应用提供实验依据。方法：采用PCR分段扩增PHB启动子，克隆入pGL3．Basic萤光素酶报告基 因载体。将构建的重组质粒用脂质体转染至人前列腺癌PC-3细胞，再分别培养于低胆固醇培养基和普通胆固醇 培养基中，检测PHB启动子各分段重组质粒萤光素酶活性的变化。限定PHB启动子约200 bp的胆固醇敏感启动 区域，找出其中的固醇调节元件(sterolregulatoryelement，SRE)同源位点并进行点突变，证实PHB基因的胆固醇敏 一117到一108 对胆固醇敏感的作用位点位于一117到一108bp的SRE同源位点。PHB可能成为前列腺癌靶向基因治疗的有效 工具。 [关键词]前列腺肿瘤；胆固醇；抑制素；固醇调节元件 [中图分类号】R363 [文献标志码]A Cholesterol-sensitiveactionsitesin of promoterprohibitingene DONG Peil”，JIANGLi-juanl，GUOSheng-jiel，UUZhuo．weil，LIYong—hon91，YAO Zi-kel，HANHuil，ZHOU Kai‘，QIN Fang-jianl inSouthern Yat-sen Cancer (1StateKey．LaboratoryofOncology China，DepartmentofUrology，SunUniversityCenter， Provincial First Guangzhou510060，China；2GuangdongKey Guangzhou LaboratoryofUrology，theAffdiatedHospitalof Medical University，Guangzhou510120，China．E-mail：zhou万@sysucc．org．cn) thecholesterol—sensitivesitesinthe of [ABSTRACT]A眦：Toverify promoter seriesofsuccessivePHB truncated were PCRandclonedinto lucifer- OD$：A promoter segmentsamplifiedby pGL3·Basic ase vector．HumancancerPC-3cellsweretransfectedwiththerecombinantandthenculturedin reporter prostate plasmids normal