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中国农学通报 2013,29(10):162-166 Chinese Agricultural Science Bulletin 百合花青素苷合成酶基因片段的克隆及表达分析 王 瑜，崔金腾，张克中，贾月慧 （北京农学院，北京 102206） 摘 要：为了克隆百合花青素苷合成酶基因(anthocyanidin synthase, ANS) ，通过已报道的其他物种的 ANS 基因保守序列设计简并引物，采用同源克隆的方法成功克隆得到了百合ANS 基因片段，该片段长 701 bp，编码233 个氨基酸残基。根据蛋白比对结果，百合ANS 基因编码的氨基酸序列与郁金香、荷兰 鸢尾、甜樱桃的一致性分别为86%、81%、77% 。采用半定量RT-PCR 法分析表明，该基因在百合花瓣中 的表达水平最高，叶和茎次之，鳞茎中不表达。本研究从百合中分离得到了ANS 基因片段，为后续获得 基因全长打下了基础。 关键词：百合；花青素苷合成酶；基因克隆；序列分析；表达 中图分类号：S682.2 文献标志码：A 论文编号：2012-3849 Molecular Cloning and Expression Analysis of Anthocyanidin Synthase Gene Fragment in Lilium WangYu,CuiJinteng,ZhangKezhong,JiaYuehui (Beijing University of Agriculture,Beijing102206) Abstract: In order to obtain anthocyanidin synthase (ANS) gene from Lilium. degenerate primers were designedbasedonsequencesblastofANSgenesfromotherspecies,andthefragmentofANSgeneinLilium wasclonedbyhomologycloningmethod.Thegenefragmentwas 701 bpencoding 233 aminoacidproteins. Sequencealignmentrevealedthat,thededucedaminoacidsequencewas 86%, 81%and 77%identicalto Tulipagesnerian,Iris hollandica and Prunusavium,respectively.TheANS expressedatdifferentlevelswith thehighestinpetal,thesecondinleafandstem.However,there’snoexpressioninbulb.ANSfragmentwas successfullyclonedfromLiliumthroughthisresearch.Thislaysasolidfoundationforcloningthefulllength cDNAsequence. Key words: lily;anthocyanidinsynthase;geneclone;sequenceanalysis;expression 0 引言 此受到了人们的广泛关注。花青素的合成由一系列的 花色是花卉最重要的观赏性状之一，它主要由类 结构基因和调控基因起作用[8] 。花青素苷合成酶ANS 黄酮、类胡萝卜素、生物碱三大类色素群决定。目前研 (anthocyanidin synthase)属于 2-酮戊二酸双加氧酶家 究得较为深入的是类黄酮中的花青素[1] 。花青素是植 族[2] ，它位于花青素合成通路末端，主要作用是催化无 物花、果实、种子等的显色物质，主要贮存在植物液