《全细胞生物催化竹笋壳制备燃料乙醇的研究 STUDY ON PRODUCING FUEL-ETHANOL FROM BAMBOO SHOOTS SHELL FIBER (BSSF) CATALIZED BY WHOLE CELL BIOCATALYST》.pdfVIP

第32卷第5期 太阳能学报 V01．32．No．5 。 2011年5月 ACI．AENERGIAESOI。ARISSINICA May，2011 全细胞生物催化竹笋壳制备燃料乙醇的研究 王 超1，姬丽婷1，林海萍2 1．浙江农林大学农业与食品科学学院，杭州311300；2．浙江农林大学林业与生物技术学院，杭州311300 摘要：以竹笋壳为原料，采用白腐菌 1sI二01 对其进行预处理后，选择纤维素酶和木聚糖酶进行酶解，并在酶解 产物中添加固定化混合菌种 嗜单宁管囊酵母和酿酒酵母 进行乙醇发酵。结果表明：白腐菌表现出优良的木质素 降解性能，经过24d，木质素的降解率达到62．1％；6％木聚糖酶和10％纤维素酶混合，在初始pH值为4．5的条件下 酶解6h，总糖转化率可达到67．54％；固定化混合菌种在发酵48h的酒精质量浓度可达到19．84∥L，高于游离混合菌 种，也远高于单一菌种。 关键词i竹笋壳纤维；白腐菌；酶降解；固定化混合菌种；燃料乙醇 中图分类号：S216．2 文献标识码：A 量 干基 分别达到50％和75％以上。将这些来源 O 引 言 广、产量高的纤维资源通过全生物途径转化为燃料 以可再生的植物纤维原料生产燃料乙醇首先要 乙醇，具有广阔的应用前景。 进行预处理。理化预处理方法需要专业的设备并消 1材料及设备 耗大量能源且容易造成环境污染。通过全生物途径 转化植物纤维原料生产燃料乙醇的研究正如火如 1．1材料 荼吣1。 1．1．1竹笋壳 高效利用植物纤维原料的关键之一在于如何降 采集自浙江农林大学后山，清洗后风干备用。 解包裹在纤维素晶体外的木质素。王宏郧等[3]研究 1．1．2预处理菌株及其培养基[93 了3株不同种属白腐菌对玉米秸秆木质纤维素的降 白腐菌 TST-01 ：浙江大学分离保藏。 解能力和规律；葛春梅等H1探讨了里氏木霉和鸡腿 种子培养基：葡萄糖209／L，玉米浆409／L， 菇利用秸秆共发酵产木质素降解酶的研究。但采用 NH4 2SO,0．49／L，阻P04 全生物途径将植物纤维原料转化为燃料乙醇的工艺 O．4∥L，Vm0．59／L，pH值5．00 过程和技术参数尚需深入探讨。本研究首先利用白 基础培养基：酒石酸铵lmL、微量元素15mL、大 3mL，加水至培养液体积为50mL， 腐菌 7眄r-01 固体发酵的方法破坏木质素的复杂结量元素15mL，Vm 构【51；再添加生物酶对纤维素和半纤维素进行降解， 其中，酒石酸铵 22．09／L 为氮源，大量元素每升含 209KH2P04，13．89MgS04’7 获得可被利用的糖类物质[6’71；在乙醇发酵阶段，为 H20，1．09CaCl2和0．69 Fe．---的4 充分利用水解液中的糖类物质，以嗜单宁管囊酵母 NaCl，微量元素每升含O．359MnS04·H20，60mg CoCl2‘6H20，95mg P．tarmophilus 与酿酒酵母 S．cerevisiae 共固定化‘7H20，110mg 来发酵原料水解糖液。 A1K so, 2。12H20，6mgH3803和6mgNa2M004‘ X 我国竹类资源十分丰富，全国竹林面积约7．2 1010m2，鲜笋年产量已达217万t[8】。在竹笋加工过 PDA斜面培养基：马铃薯汁2009／L，葡萄糖 程中，笋基与笋壳均被丢弃，而笋基、笋壳粗纤维含 209／L，琼脂209／L，pH值自然。 收稿Et期：2010-08—30 2010n1026 通讯作者：王超 19r7一 ，男，硕士、讲师，主要从事发酵工程及生物质能源方面的研究。tianshan@zafu．edu．cn 万方数据 5期 王超等：全细胞生物催化竹笋壳制备燃料乙醇的研究 731 1．1．3酶解用酶 处理前、后液体中的还原糖量。还原糖测定采用 纤维素酶、木聚糖酶购自浙江腾天生物科技有 DNS比色定糖法 540,,m 【11|。 限公司，酶活分别为40000u／g和8000u／g。 2．2．1单因子试验 1．1．4发酵产乙醇菌株及其培养基 设置pH值、酶的用量和原料处理方式等三因素 对竹笋壳酶解糖化的影响试验。 嗜单宁管囊酵母 P．tannophilua ：该菌种能够 同步发酵木糖和己糖，浙江工业大学保存；酿酒酵母 1 竹笋壳糖化的起始pH试验 S．cerevisiae ：浙江工业大学保存。 设置pH值分别为4．5、5．0、5．5、6．0、6．5和7．0， 对竹笋壳进行混合酶水解糖化，测定水解后的还原 酵母细胞培养基：葡萄糖209／L， N地 ：s04 糖量。 59／L，蛋白胨209／L，酵母膏109／L，琼脂209／L。 2 混合酶的用量试验 酵母细胞液体培养基：葡萄糖209／L， m